化学生物学 化物质与蛋白质的相互作用.pptVIP

第六章 化学物质与蛋白质的相互作用 一、沉淀作用的类型 1．可逆沉淀(非变性沉淀 ) 一、沉淀作用的类型 2．不可逆沉淀（变性沉淀 ） 二、沉淀剂的类型 第三节 化学物质对蛋白质侧链基团的共价修饰作用 2．蛋白质分子中的可反应基团 氨基酸的氨基和羧基 丝氨酸和苏氨酸所特有的羟基 半胱氨酸的巯基 精氨酸的胍基 组氨酸的咪唑基 酪氨酸中的酚基 色氨酸的吲哚基 第四节 蛋白质光谱探针 考马斯亮蓝G-250测蛋白质含量 1．巯基的化学修饰 烷基化试剂（碘乙酸、碘乙酰胺 ） 多肽链氨基酸顺序分析过程中防止半胱氨酸的氧化 N-乙基马来酰亚胺 有较强专一性和光吸收的变化，易于确定反应程度 5,5’-二硫-2-硝基苯甲酸（DTNB） 有机汞试剂（对氯汞苯甲酸 ） 溶于水中形成羟基衍生物，与巯基相互作用时在255nm处光吸收具有较大的增强效应 2．氨基的化学修饰 非质子化赖氨酸的ε-氨基是蛋白质分子中亲核反应活性很高的基团 三硝基苯磺酸（TNBS）与赖氨酸残基反应，在420nm和367nm能够产生特定的光吸收 2,4-二硝基氟苯（DNFD）法、丹磺酰氯（DNS）法和苯异硫氰酸酯（PITC）法都是常用的氨基修饰方法。 3．羧基的化学修饰 水溶性的碳化二亚胺类化合物 4．咪唑基的化学修饰 组氨酸残基的咪唑基可以通过氮原子的烷基化或碳原子的亲核取代来进行