天然生物支架材料在软骨修复中的研究进展..docVIP

善意的等待 踮起脚尖，伸长脖子，我终于等来了 “344”公交车清 泉，杨志明 关键词】软骨修复 关节软骨缺乏再生能力，外伤或疾病引起的软骨缺损需 利用软骨或其它材料修复。自体软骨来源有限，且容易造成 供区缺损，应用受到限制。异体软骨曾广泛应用，但可引起 免疫排斥反应，而导致细胞死亡及功能丧失。骨膜移植曾风 行一时，但其存在远期效果不稳定的缺陷，使得人们不断探 索更完善的修复方法。体外软骨细胞培养成功，引发人们尝 试直接用软骨细胞修复软骨缺损。1968年，Chertman等将软 骨细胞悬液注射到关节软骨缺损部位，结果表明：缺损为滑 膜成纤维组织修复，镜下仅见少量新生软骨细胞结节。1977 年，Green等以脱钙骨作为支架，并接种上软骨细胞，移植 到缺损部位。虽未成功，可喜的是 第一次提出：如能找 到一种合适的支架材料，将软骨细胞接种于其上，即有可能 形成良好的软骨组织修复。当前，在组织工程中开发为细胞 培养支架的生物支架材料主要分为两类，即天然生物支架材 料和人工合成的支架材料。天然生物支架材料具有细胞信号 识别，促进细胞的黏附、增殖和分化、良好的生物相容性及 良好的生物降解性等优点，显示出人工合成支架材料无可比 拟的优势。本文就天然生物支架材料在软骨修复中的现状和 研究进展做如下综述。 1天然脱细胞生物支架材料 天然脱细胞生物支架材料主要利用同种或异种器官/ 组织，经脱细胞、去除抗原处理得到脱细胞基质材料。细胞 外基质(ECM)是由细胞自身分泌组成的并围绕在细胞周围主 要含有胶原蛋白、纤维蛋白粘连素、层粘连蛋白，层连素等。 细胞外基质不仅为细胞提供了一个支持结构和附着位点，而 且对细胞的粘附、迁移、增殖、分化以及基因表迗的调控有 重要作用和显著影响。目前已经有研究应用同种异体脱细胞 材料修复膀胱、尿道、动脉和皮肤缺损［1?3］，以及构建 心脏瓣膜［4］，结果比较满意。另外关于脱细胞软骨基质和 小肠粘膜下基质(SIS)这2种天然的细胞外基质材料应用也 有相关的研究报道［5?7 ］。 脱细胞基质材料具有多种天然细胞外成分，有利于细胞 的吸附，增殖和分化并具有一定的力学强度，可作为组织填 充物而长期存在；并且具有较好的组织亲和性和相容性，可 诱导软骨细胞向其中生长而重建软骨，在未来组织修复中它 们将拥有广泛的应用前景；但其脱细胞后的孔穴大小及孔穴 间的连接缝隙的大小制约着种植细胞向深层发展。 2胶原支架材料 胶原是人体内含量最丰富的蛋白，占人体蛋白总量的30°/。 以上，其中以细胞外基质中胶原蛋白含量最高。胶原蛋白在 体内以胶原纤维的形式存在，其基本组成单位是原胶原分子， 原胶原蛋白分子经多级聚合形成胶原纤维。胶原纤维与细胞 外基质中其它成分形成结构与功能的复合体。胶原作为天然 的生物材料，其本身无毒性，可被细胞酶类识别、标记、降 解，有利于软骨细胞黏附、增殖和分化，还可刺激移植组织 产生新的胶原，并且降解产物可被机体吸收。 Wakitani等用I型胶原凝胶与软骨细胞或间充质干细 胞混合后修复兔膝关节软骨的全厚度缺损，取得较为满意的 结果［8,9］。Wambach等从狗甲状软骨上获得的软骨细胞种 植到牛I型胶原纤维上体外培养，结果发现甲状软骨细胞在 I型胶原基质中，通过产生II型胶原，表迗自身表型［10］。 Stone等设计了一种用作半月板再生的胶原支架，经FDA批 准后在10位病人身上作了初步的临床实验［11，12］。实验 结果表明，胶原支架是可移植的，而且在3a的植入期内是 安全的，支架支持半月板缺损的组织再生，在连续的血清学 测试中未发现不良的免疫反应。术后6个月通过关节镜检查 发现新生成的软骨组织替代了已被吸收的原植入物。1^6用 II型胶原作支架培养软骨细胞，结果表明细胞生长和功能表 达良好［13］。这些结果表明利用胶原材料作为基质支架开 发组织工程化软骨是可行的。 I、II型胶原由于含有特别的识别信号，有利于软骨细 胞粘附、增殖、分化，可作为良好的材料包埋添加剂。缺点 是缺乏一定的机械强度，难于塑形，支架材料在体内降解过 快，新生软骨组织生化组成也难于评价。另外，由天然生物 材料制备的胶原，每批产品之间，还存在着生化性质的差异。 3纤维蛋白支架材料 纤维蛋白凝胶在软骨组织工程中的应用仅排在聚乳酸( polylacticacid, PLA )、聚经基乙酸(PolyGlycol icAcid, PGA)和胶原材料之后。纤维蛋白与胶原一样，本身就来自天 然的细胞外基质，因此，也具有很好的生物相容性。纤维蛋 白凝胶是纤维蛋白单体在凝血酶作用下聚合成的具有可塑 形、可黏附性、可降解性及生物相容性的立体网状结构凝胶， 它可通过减慢凝血酶的聚集，因而减慢它从液态转变为凝胶 的过程，为凝胶的塑形提供充分的时间。纤维蛋白凝胶聚合 时能释