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360°视角看ART：从控制性卵 巢刺激到胚胎选择的创新技术 William Schoolcraft，MD，HCLD 科罗拉多生殖医学中心 控制所有系统变量，获得最佳结局 影响生育的一般因素 生活方式 可能影响女性的一般健康状况 包括活动、行为或环境 日益增加的证据表明，选择不同的生活方式可以影响不孕 确定“生育饮食”评分的标准 肥胖和ART 诱导排卵结局 更多的Gn，包括阈值和总量 更多的刺激天数 更少的中等和大体积的卵泡 体外受精结局 更多刺激天数，更低E2峰值 更高取消率--正常体重10.9%对比病态肥胖25.9% 影响生育的一般因素 吸烟和生育 降低：月经周期的子宫内膜血管化，子宫容受性，受精，植入，妊娠和活产率，绝经年龄 增加：基础FSH用量，IVF周期取消率，流产率，多胎妊娠风险 其他影响因素 咖啡因，酒精，压力以及环境污染 找到适用卵子的技术 极光显微镜（PolScop）可预测妊娠结局 --正常/异常纺锤体 卵丘细胞基因表达可作为卵母细胞及随后胚胎质量的预测因子 --COX2，Gremllin，HAS2表达在高分级胚胎中表达增加 CC蛋白谱 精子的选择 IMSI：亲缘卵母细胞注入Ⅰ/Ⅱ级和Ⅲ/Ⅳ级精子后的胚胎发育结局：25名患者 找出高质量的胚胎进行移植 形态学 OMICS技术 基因组学转录组学—有创性 蛋白组学代谢组学—无创性 每种技术都有其优点和缺点 基因组学 分泌组学印记与囊胚发育有关 目前已在多种体液中确认存在泛素或游离泛素分泌 在扩大的囊胚中出现泛素的上调 整倍体囊胚与异倍体囊胚相比具有独特的分泌组学印记 代谢组学 全面研究特定细胞过程留下的独特化学印迹 与那些不能获得妊娠的囊胚相比，可存活的人囊胚的代谢印迹不同 代谢对胚胎发育和存活能力的重要性 --能量是任何细胞生存和发育的基础 --植入前胚胎的代谢在发育和分化期间存在变化 --代谢调节的缺失和发育不良与存活能力丧失有关 胚胎代谢和存活能力的无创分析 光谱学 荧光/微荧光/超微荧光 自参照电极 HPLC LC-MS QQQ Raman 近红外线光谱学 NMR 芯片（微流芯片）实验室 D1-D3 以丙酮酸、乳酸和特殊氨基酸为基础的代谢 D4-D5转为以葡萄糖为基础的代谢 营养利用和代谢分析已成功用于开发更高效的培养基体系：碳水化合物 氨基酸 O-115，ESHRE，2009，Gardner，D 研究目的是采用单囊胚移植模型观察人囊胚的氨基酸利用与妊娠结局之间是否存在差异 与那些不能产生妊娠的囊胚相比，可存活囊胚整体消耗的氨基酸池更低 两种之间差异最显著的氨基酸为丙氨酸 可存活囊胚产生的丙氨酸增多可能反映其对胚胎毒性胺的转氨能力更强 结论 生活方式对生殖治疗结局具有显著影响 为设计出合适的治疗周期，仔细评价男性、排卵及子宫因素非常重要 已有工具用来评价用于ART的卵母细胞和精子的质量 基因组学转录组学是评价胚胎能力有创但有效的工具 个体胚胎的代谢组学分析已经可以定量分析 特定营养成分分析、代谢途径流量、氨基酸周转和代谢印迹的一般分析与人胚胎存活能力显著相关，从而在移植前定量分析胚胎存活能力 通过微流仪进行简化代谢分析可能在今后的临床实践中作为一种经济的方法得到应用 * * 配子胚胎变量 实验室变量 胚胎学家变量 COH可用药物 专科医生变量 护理变量 患者子宫变量 患者变量 1/周或更少 低脂乳品（份） 1/天或更多 高脂乳品（份） 超过54.3 铁（mg/天） 6或更多 多元维生素（片/周） 低于107单位 （每单位相当于从白面包中摄取1g糖） 糖负荷 高于5.7 植物蛋白（卡路里所占百分比） 低于11.5 动物蛋白（卡路里所占百分比） 超过9.6 单不饱和脂肪酸与反式脂肪酸比例 1 5（最佳） 饮食因素 IMSI（精子形态学选择胞浆内注射）：高倍光学显微镜，放大6300倍，选择形态良好的精子，以获得较好的胚胎率及着床率 0.001 3.8(3) 60.5(52) 囊胚 NS 30.8(24) 43.0(37) 第三天优质胚胎 NS 82.1(64) 88.4(76) 第三天胚胎 NS 84.6(66) 89.5(77) 接合子 %（n） NS 78 86 注入卵母细胞数，n P值 Ⅲ/Ⅳ级 Ⅰ/Ⅱ级 注入精子类型 PGS可用于异倍体筛查 广泛染色体筛查（CCS） -中期比较基因组杂交技术（mCGH） -微阵列技术（Microarray） -RT PCR 蛋白组学代谢组学 蛋白组学和代谢组学在研究人胚胎分泌蛋白质组学、发展无创筛查方法方面相互补充 蛋白 细胞功能 代谢产物 蛋白组学 代谢组学 培养基 液滴培养 分子相互作用 功能性终产物