常见的细胞培养基本技术全面知识普及.ppt

贴壁细胞 贴壁细胞 贴壁细胞 无菌技术 每人准备一套实验材料（器皿、溶液等），不可混用。 无菌的思想贯穿到细胞培养的任何操作步骤。 概念——“代” 细胞分裂一次？ 错！ 培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养。这个过程就称为传代（passage）或者再培养（subculture）。 传代培养的要诀（一） 该出手时就出手！ 该换液时就要换液，该传代时就要传代！ 否则，细胞就不是那个细胞 细胞会衰退、分化、生长缓慢…………，多数情况下很难扭转和补救。 传代培养的要诀（二） 勤观察 每天肉眼观察培养基颜色是否异常，有无混浊 观察培养基颜色变化速度是否异常：变化过慢意味着细胞生长过于缓慢；变化过快而细胞密度并不大，表明有污染的可能性。 镜下观察细胞形态、生长速度。 观察培养箱水盘中的水是否干净。 观察CO2压力表。 观察液氮罐内液氮体积 传代培养的要诀（三） 严格无菌操作 轻柔：避免机械力损伤细胞，重悬细胞时尽量用50ml离心管，通过晃动离心管分散细胞，尽量避免过力吹打。离心力不可超过300g（普通台式离心机水平转子1000rpm）。 快速：防止因过分小心导致操作时间过长，增加污染概率。 每代贴附生长细胞的生长过程  每代贴附生长细胞的生