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- 2018-11-04 发布于山东
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常见的细胞培养技术入门
细胞培养技术入门 ◆ 在细胞培养中注意的一些问题 ◆ 细胞培养的实验程序 ◆ 细胞的复苏 ◆ 细胞的计数 ◆ 细胞(贴壁)的传代培养? ◆ 细胞的冻存 ◆ 悬浮细胞的培养方法 在细胞培养中注意的一些问题 环 境 由于体外培养细胞没有抗感染能力,若实验者粗心大意,技术操作不规范,也会导致污染。因而,每一项工作都必须做到有条不紊和完全可靠,特别是实验环境更为重要。 ★ 超净工作台 台面每次实验前要用 75%酒精擦洗,然后紫外线消毒30 min。消毒时工作台面上用品不要过多或重叠放置,否则会遮挡射线,降低消毒效果。一些操作用具如移液器、废液缸。污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线照射消毒。在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线。 2. 培养前准备 在开始实验前要制定好详细的实验计划和操作程序,有关数据的计算要事先做好。根据实验要求,准备各种所需器材和物品、清点无误后将其放置到培养室、超净台内,然后开始消毒。这样可以避免开始实验后,因物品不全往返拿取而增加污染机会。 3. 培养条件 ★ 气体环境:95%空气加5%CO2混和气体 环境中。 ★ PH值:7.2~7.4 ★ 温度:37℃ 培养实验用品的前期处理 1.清洗和浸泡: (1)玻璃器皿:新的玻璃器
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