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- 2018-11-28 发布于天津
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动物组织学与胚胎学的概念及研究内容 - POWERPOINT 演示文稿培训教材.ppt
第一章 绪 论 一、动物组织学与胚胎学的概念及研究内容 (一)动物组织学的概念和研究内容 1、概念:研究动物(主要是家畜和家禽)机体微细结构及其相关功能的科学,亦称微视解剖学。 2、微细结构的涵义:光镜或电镜下所显示的结构,分为显微结构与超微结构: ⑴、显微结构(光镜结构) 放大倍数:几十至几千倍 最高分辨率:0.2微米 常用计量单位:微米 1、组织学制片技术:组织学最基本和经常使用的技术。 (1)切片法:在切片机上把组织切成薄片。常用的有石蜡切片,冰冻、火棉胶及超薄切片 (2)非切片法:有涂片(血液、骨髓、精液)、磨片(骨)、铺片(疏松结缔组织)和装片(鸡胚)等。 2、组织化学技术:包括细胞化学技术,指通过化学或物理反应形成有色的沉淀来显示组织细胞内的化学成分。 3、免疫组织化学技术:利用特异性的抗原抗体反应来研究组织或细胞内所含抗原物质的定位和定量技术。 4、显微放射自显影术:亦称同位素示踪术,指应用某种具放射性的同位素标记物,注入动物体内或加入细胞的培养基内,该物质被细胞摄取后,将组织或细胞制成切片或涂片进行观察。 (二)活体组织研究法 1、组织培养术:亦称体外实验,是把离体的活细胞、组织甚至器官放入培养液中,在无菌条件下生长,观察其形态变化。 克隆(clone):在培养皿内分离出的单个细胞进行培养后可获得由单细胞繁殖的纯细胞株,称为克隆。 2、活体染色:把染料(无毒或毒性很小)注入活体动物体内,在体内被一些细胞摄取后,处死动物后制成切片,观察染色情况,可研究细胞的吞噬功能及分布情况。 3、细胞融合:应用人工方法将两个或两个以上的细胞合并成一个新细胞的技术。可培育出新的动物杂交品种,具有非常广阔的应用前景。 4、细胞电泳:在显微镜下观察细胞在电场作用下泳动速度。 (三)显微镜 1、光学显微镜(light microscope, LM) (1)生物显微镜:组织学中最常用的观察工具。 (2)荧光显微镜:用来观察组织细胞中的荧光物质。 (3)相差显微镜:多用于观察活细胞的各种形态。 (4)暗视野显微镜:观察胞核、线粒体、纤毛的运动等。 (5)偏光显微镜:某些组织细胞由于微细结构的不同,当光线通过标本时,光速和折射率会发生改变的特性制作的。 (6)共聚焦激光扫描显微镜:是种新型的高光敏度、高分辨率的生物显微镜,以激光为光源,采用共聚焦成像系统和电子光学系统,可使样品内任何一点的反射光形成的图像都被准确地接受下来并产生信号,传递到彩色显示器上,再连接到微机图象分析系统进行分析处理。 2、电子显微镜(electron microscope,EM) (1)、透射电子显微镜:光源为电子流,用电子枪将电子束穿透标本,投射到荧光屏上出现黑白反差的结构图像,呈现深色的结构电子密度高,反之电子密度低。分辨率达0.2nm。 (2)、扫描电子显微镜:特点是视场大,景深长,样品制作比较简单,在荧光屏上扫描成像,呈现立体感强的表面图象,能显示三维的超微结构。缺点是不能见到组织细胞的内部结构。分辨率为5~7nm。 (3)超高压电子显微镜:电压在500Kv以上,电子束可穿透较厚的切片,用于观察和研究细胞内部的立体超微结构。 (四)胚胎学技术 1、描述胚胎学:应用组织学和解剖学的方法观察胚胎发育的形态演变过程,是胚胎学的基本内容。 2、比较胚胎学:比较不同种系动物的胚胎发育。 3、实验胚胎学:对胚胎或体外培养的胚胎组织给予理化因素刺激,或施加显微手术,观察其对胚胎发育的影响。 4、化学胚胎学:应用化学与生化技术揭示胚胎生长发育过程中诸多化学物质的质与量的变化及代谢过程。 5、分子胚胎学:用分子生物学的理论和方法探索胚胎发生过程中基因表达的时间顺序,空间分布与调控因素,研究基因表达产物—蛋白质,从根本上阐明胚胎发育的分子过程和机理。 6、生殖工程学:人工介入早期生殖过程,获得人们期望的新生个体。主要技术有体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植、卵质内单精子或细胞核注射、配子和胚胎冻存等。试管婴儿和克隆动物是该领域中最著名的成就。 胚胎学是门丰富多彩的学科,具有重要的理论意义和实用价值,“是一门充满魅力的学科” 。 五、组织学常用的染色方法 1、嗜酸性:组织细胞内碱性物质与酸性染料(如伊红)有较强的亲和力,染色结果为红色。 2、嗜碱性:组织细胞内酸性物质与碱性染料(如苏木素)有较强的亲和力,染色结果为蓝色。 3、异染性:有些组织细胞的结构染色时会呈现与染料完全不同的颜色。 4、HE染色:即苏木精·伊红染色,简称HE染色,是最经典和最常用的染色方法。有关HE染色的染色特性有三种:嗜酸性、嗜碱性、嗜中性。 5、银染法:亦称镀银或
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