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实用标准文案 精彩文档不容错过 EGB制剂、阿司匹林及波立维抗血小板聚集作用比较及对PAF含量影响 徐露 董志 王如伟 黄黎 （重庆医科大学 药学院 重庆市生化与分子药理重点实验室 400016 ） 【摘要】目的 观察EGB（银杏叶提取物）制剂、阿司匹林及波立维对家兔血小板聚集率及PAF含量的影响。方法 采用体内实验，观察EGB制剂、阿司匹林及波立维对由花生四烯酸（AA）、二磷酸腺苷（ADP）和血小板活化因子（PAF）诱导的家兔血小板聚集作用的影响，以及对给药前后家兔血小板活化因子（PAF）含量的影响。结果 与生理盐水组相比，EGB制剂抑制AA、ADP、PAF诱导的家兔血小板聚集有显著差异（p0.05，p0.01），并能够降低血清中PAF的含量（p0.05）；阿司匹林对AA诱导的血小板聚集有显著差异（p0.01）；波立维对ADP诱导的血小板聚集有显著差异（p0.01）；而阿司匹林和波立维对PAF的含量没有显著影响（p0.05）。结论 EGB制剂具有抗血小板聚集作用，抗PAF诱导的血小板聚集作用最强，并能显著降低PAF含量，是一种新的作用途径的药物，为临床抗血小板聚集的用药提供了新的选择。 EGB（银杏叶提取物）制剂是由银杏叶提取得到的，它的活性成分主要是黄酮和银杏内酯，具有抗炎和保护神经作用。阿司匹林和波立维是临床常用的抗凝药物。本实验将比较这三种药物抗血小板聚集的途径及靶点特异性。 材料与方法 1.1仪器与试剂 日本大耳白兔，体重2.0±0.2kg，雌雄各半，由重庆医科大学实验动物中心提供；EGB制剂（天保宁片，浙江康恩贝制药股份有限公司生产）、阿司匹林（拜耳药业）、波立维（赛诺菲-安万特）；AA（sigma）使用时将其溶解在1%碳酸钠溶液中，配成0. 35mmol/L的浓度；ADP（sigma）溶于磷酸盐缓冲液,最终浓度为300μmol/L；PAF（cayman）溶解在PH为7.6的含0.25%小牛血清蛋白的Tris-NaCl溶液中，终浓度为3.6nmol/L；枸橼酸钠（北京中杉金桥生物技术公司）蒸馏水配成3.8%的浓度；TYXN-96多功能智能血液凝聚仪（上海通用技术研究所研制）；兔血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒（Uscnlife）；酶标仪（spectra maxm2多功能酶标仪）。 1.2方法 1.2.1分组及给药方法 日本大耳白兔28只，随机分为4组，每组7只：生理盐水组、EGB制剂组、阿司匹林组、波立维组。以上各组剂量均根据文献[1]由人体剂量换算为家兔等效剂量，ig给药，生理盐水组、EGB制剂组每日三次，阿司匹林和波立维组每日给药一次，连续7d。 1.2.2检测血小板聚集率及PAF含量 每只动物首次给药前，耳缘静脉抽血1ml，室温放置2h取血清，检测给药前PAF含量。在第7d给药后1h，心脏取血7ml，分出1ml用于检测给药后PAF的含量，剩余6ml用3.8%枸橼酸钠1：9抗凝，800r/min离心10min，取上清得富血小板血浆（PRP），剩余部分3000r/min速度离心15min，取贫血小板血浆（PPP）。用PPP调节PRP，使PRP血小板数目在360×109/L。测定并记录在不同诱导剂下1min、5min及最大血小板聚集率。 血小板聚集率（%）=（对照组血小板聚集率-给药组血小板聚集率）/对照组血小板聚集率×100 1.2.3统计方法 血小板聚集率检测用生理盐水组与给药组比较，采用成组t检验；PAF含量检测采用给药前后自身对照，用配对t检验。 2.2结果 2.2.1家兔血小板聚集率的检测结果 检测结果表明，和对照组相比， EGB制剂能抑制AA、ADP、PAF诱导的家兔血小板聚集(p0.05, p0.01)，并且对PAF诱导的血小板聚集抑制作用最强(38.93%)；和对照组相比，阿司匹林对AA诱导的血小板聚集有显著差异（p0.01）；波立维对ADP诱导的血小板聚集有显著差异（p0.01）。（见表1-3） 表一 AA诱导的血小板聚集作用（±s,n=7) 组别 给药剂量 mg/kg 给药次数（次/d） 给药后聚集率（%） 血小板聚集抑制率(%) 1min 5min Max 生理盐水组 等容积 3 30.12±5.24 54.15±7.56 55.69±9.84 EGB制剂（天保宁） 20.53 3 29.50±5.63 40.66±6.53** 42.80±7.13* 23.15 阿司匹林 5.13 1 30.74±5.27 33.54±5.88** 35.95±6.02** 35.45 波立维 3.85 1 29.72±4.57 50.05±8.83 53.60±9.36 3.75 与生理盐水组相比，**p0.01,*p0.05 表二 ADP诱导的血小板聚集作用（±s,n=7) 组别 给