常见的交叉配血试验临床应用.ppt

交叉配血试验 交叉配血试验 一、实验目的 二、实验原理 三、实验步骤 四、方法学局限性 五、临床意义 六、临床新进展 实验目的 掌握凝聚胺交叉配血试验的原理、方法、 结果判读 熟悉交叉配血试验的临床意义 实验原理 交叉配血试验分两管： 主侧：受血者血清+供血者红细胞 次侧：供血者血清+受血者红细胞 实验原理 红细胞表面带有大量的负电荷，悬浮在电解质溶液中，会吸引大量阳离子，红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，形成zeta电位。 实验原理 凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM）降低介质的离子强度，减少红细胞周围的电子云，如有红细胞抗原相应的血清抗体存在，则可促进红细胞抗原与血清抗体的特异结合。 实验原理 再加入凝聚胺溶液，溶解后产生很多正电荷，中和红细胞表面带有的负电荷，红细胞zeta电位降低，缩短红细胞距离，无论是否有红细胞抗原相应的血清抗体存在，主、次侧管均可产生非特异性聚集。 实验原理 最后加入悬浮液，具有中和凝聚胺阳离子的作用，使正常红细胞的非特异性凝集散开，红细胞抗原与相应血清抗体的特异性凝集仍然存在。 实验步骤 一、取出供血者血浆及红细胞，并将冰冻血浆放入37℃温箱解冻15分钟。 实验步骤 二、受血者抗凝全血标本离心备用 3000r/min，5min 实验步骤 三、将受血者血浆2滴加入主侧管，红细胞1滴加入次侧管 实验步骤 四、剪下供血者血袋上的血辫，将供血者红细胞1滴加入主侧管，血浆2滴加入次侧管 实验步骤 五、在主次侧各加入低离子溶液各0.65毫升，混合均匀。 实验步骤 六、在主、次侧管分别加入2滴凝聚胺溶液，混匀后3400r/min离心10秒，弃去上清，观察红细胞的非特异凝集现象。 弃上清 实验步骤 七、最后各加入悬浮液2滴，轻轻转动试管混匀并观察结果。 实验步骤 八、如果在60秒内，主、侧管凝集均散开，说明是由凝聚胺溶液引起的非特异性凝集，配血相合。 实验步骤 九、如果凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合，如有疑问，可进一步镜检确认。 实验步骤 十、同时对受血者ABO和RH血型使用玻片法进行复查。 实验步骤 十一、对受血者ABO和RH血型使用玻片法进行复查。 临床意义 一、保证输血安全 二、发现亚型和不规则抗体 方法学局限性 对罕见不规则抗体抗K敏感性低！ 临床新进展 流式细胞术 基因分型技术 卡式微柱凝胶法 卡式微柱凝胶法 卡式微柱凝胶法 戴安娜全自动配血系统 卡式微柱凝胶法可实现自动检测 二 实验原理 ? ? ? ? 血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型。 见下表 谢谢！ * *