第5章 分子平上的基因功能(下).pptVIP

5.8 基因表达的调控 5.8.1　 基因表达调控的多水平性 生物体的每个活细胞都含有相同的一整套基因。 基因表达具有高度的时空专一化：如肌红蛋白基因（肌细胞） 基因表达的调控：生物有机体对其基因表达的时空程序、表达速率等所进行的调节和控制。 本底水平表达：调控处于关闭状态，只翻译极少量的蛋白质 5.8.2　原核类基因的表达调控 一、操纵子与操纵子模型 操纵子学说/操纵子模型： F.Jacob J.Mond（1960）E.coli lac operon( 1965诺贝尔医学生理学奖) 操纵子：核酸分子上调控基因转录活性的基本单元，由结构基因、操作子（O）和启动子（P）组成。 转录、翻译、合成蛋白 结合调节蛋白 结合RNA聚合酶 5.8.2.1　乳糖操纵子 1 调控位点 (1) Operator 操纵基因 (2) CAP(catabolite gene activation protein) or CRP(cAMP受体蛋白)结合位点 (3) Promotor 2 诱导物为乳糖 诱导物的加入和去除对lac mRNA的影响 Jacob和Monod构建了局部二倍体（merodiploid），携带着野生型和组成型的等位基因。野生型等位基因证明是显性的。野生型细胞可以产生某种物质使lac基因关闭。这种物质也可以使组成型基因表达关闭，从而局部二倍体也是诱导型的。这种物质他们命名为repressor。组成型菌株的repressor基因有缺陷性突变，即lacI-。 5.8.2.2 色氨酸操纵子 1.结构 2.特点: (1) trpR(89’)和trpABCDE(25’)不连锁； (2) 操纵基因在启动子内 (3) 有衰减子(attenuator) (4) 启动子和结构基因不直接相连，二者被 前导顺序(Leader)所隔开 3.调节 (1) Trp作为辅阻遏物(corepressor) (2)阻遏物和 RNA pol 在P,O重叠区产生竞争性抑制； (3)阻遏物的阻遏能力低，是LacR的1/千； (4) trpO调节合成代谢，存在衰减作用。 5.8.3　真核生物基因表达的调控 在真核生物中基因表达的调节其特点是 （1）多层次 （2）无操纵子和衰减子 （3）个体发育复杂 （4）受环境影响较小 5.8.3.1　DNA结构与基因的表达调控 　　DNA分子的核苷酸序列不仅带有编码信息，也带有构象信息。DNA的结构与功能是紧密相关的，实验证实，某一基因表达与否及表达效率的高低既与DNA的一级结构有关，也与DNA的高级结构有关。 1、染色质的结构与基因的表达调控 　　　在真核生物中，DNA包装成染色质的高度有序核蛋白复合物(图7-13)，它的结构在有潜在转录活性的形式和转录抑制的凝聚状态之间转换。染色质结构对基因活性的调节使大部分基因完全被抑制或激活，这对含有庞大基因组的生物可能是有利的。 图7-13　组蛋白DNA复合物 组蛋白与非组蛋白对基因转录的调控模型 2.　DNA超螺旋结构的影响 　　双链DNA分子的两条链绕轴卷曲成双螺旋（二级结构），然后双螺旋再卷曲成超螺旋（三级结构），超螺旋还可以卷曲成更高级的结构。体外实验表明，只有把DNA卷曲成超螺旋才可能进行复制和转录。其中复制受超螺旋程度的影响不大，复制酶不管模板的超螺旋松紧度如何都可进行正常复制，而转录却不同，转录极易受到超螺旋松紧程度的影响。 3.　DNA甲基化对基因表达的影响 　　甲基化(methylation)是在甲基化酶(methylase)的作用下，将一个甲基添加到DNA分子中的碱基上，最常见的是胞嘧啶甲基化形成5-甲基胞嘧啶，用mC表示。真核生物DNA中大约20-70%的胞嘧啶存在着甲基化修饰。甲基化多发生在CG二核苷酸对上，分半甲基化5‘mCpG3’/3‘GpC5’，和完全甲基化5‘mCpG3’/3‘GpCm5’两种。使用某些II型限制性内切酶可以研究DNA序列的甲基化状况，如HpaII识别并切割未甲基化的CCGG(CˉCGG)，而MspI识别无论是否甲基化的CCGG，切割后的片段分别进行电泳，即可鉴定这些CCGG序列是否甲基化。 用限制性内切酶鉴定CCGG序列是否甲基化。数字为酶切后的DNA片段编号 5.8.3.2　调控序列和调控蛋白对基因表达调控的影响 真核细胞的一个基因调控区(gene control region)包括启动子及对其调控的所有的调控序列(regulatory sequence)。这些调控序列距离启动子或远或近，多数在基因的上游，也有的在下游。在高等真核细胞中一个基因的调控序列往往扩展达5