第5章 转录转录后加工(下).pptVIP

（三）第III类内含字的剪接----hnRNA的剪接 hnRNA通常以结合有蛋白形式存在，称为hnRNP 人类遗传疾病中有15%与mRNA的异常可变剪接有关 1.hnRNA的结构特点①边界序列：符合GU-AG规则。内含子5’端总是GU，3’端总是AG。②分枝点序列：为Py N Py Py Pu A* Py，且具有2′-OH。 2.剪接机制：剪接体与磷酸酯键转移反应 剪接途径分为两步： （1）5’剪接位点的断裂 分枝点A2’OH亲核进攻Intron 5’G，形成5’-2’磷酸二酯键，Exon1 3’端被游离 （2） 3’剪接位点的断裂 和外显子连接 Exon1 3’OH亲核进攻Exon2的5’端，两Exon以3’-5’磷酸二酯键相连，切除的Intron呈套索（lariat）状 3.剪接体及组装GU-AG内含子剪接装置的核心成分包括一组snRNPs：U1、U2、U5、U4/U6，组装成剪接体（splicesome） a.U1结合5’剪接点 b.U2结合分支点 c.U5/U4/U6三聚体结合 U1释放，U6结合5’剪接点 d.U5易位，结合至3’剪接点，U4释放 e.U6/U2催化磷酯键转移反应，套索形成 snRNAs and splice site 酵母中约400个核tRNA基因中有40个不连续基因，每一个含有一个内含子，与反密码子相邻，长度大约14-46bp。 （四）. 第四类内含子的剪接--tRNA的剪接 剪接过程如下： 第一步：内切核酸酶催化的两个磷酸二酯键的断裂，形成两个tRNA半分子 第二步：RNA连接酶催化的依赖于ATP的连接反应 tRNA内含子的剪接不涉及转酯反应 （五）顺式和反式剪接 顺式剪接：内含子的剪接发生在同一基因内，切除内含子，相邻的外显子彼此连接。 反式剪接：不同基因的外显子剪接。 五、RNA编辑（RNA editing）RNA编辑：指转录后的RNA在编码区发生碱基的加入、丢失或转换等现象。90年代发现guideRNA（gRNA），它是一类新的小分子RNA，可以和mRNA分子被编辑的部分发生非常规的G-U互补配对，对mRNA前体分子的编辑起指导作用。 G U 哺乳动物RNA编辑举例 组织 靶RNA 变化 影响 肝、小肠 载脂蛋白B mRNA C→U Glu密码子转变为终止密码子 肌肉 α-半乳糖苷酶mRNA U→A Phe密码子转变为Try密码子 睾丸、肿瘤 Wilms肿瘤-I mRNA U→C Leu密码子转变为Pro密码子 肿瘤 I型神经纤维瘤mRNA C→U Arg密码子转变为终止密码子 脑 谷氨酸受体mRNA A→G Gln转变为Arg 例： 本章应该掌握的内容 概念：启动子，终止子，-10序列，-35序列，CAP结合位点，RNA的成熟或转录后加工，RNA剪接，RNA编辑，gRNA 转录与复制的异同；原核生物启动子的结构；真核生物启动子的类型；原核和真核生物转录启动子的结构异同；转录的基本过程 mRNA前体包括哪些加工？rRNA前体包括哪些加工？tRNA前体包括哪些加工？ I类、II类和hnRNA的剪接的基本过程是什么？ 第五章 转录与转录后加工 Part 2 第一节 转录的基本原理 第二节 与转录起始和终止有关的DNA结构 第三节 原核生物和真核生物转录及抑制剂 第四节 转录后加工及其机制 总RNA 编码RNA， 占总量的4% 非编码RNA， 占总量的94% hnRNA mRNA pre rRNA rRNA Pre tRNA tRNA snRNA snoRNA scRNA tmRNA 细胞内的RNA组分: 一、原核生物转录的起始 原核生物mRNA不需要加工，通常在转录完成之前 就开始翻译. 1.全酶与模板的DNA接触，生成非专 一的,不稳定的复合物在模板上移动； 2. 起始识别：全酶与－35序列结合， 产生封闭的酶-启动子二元复合物 （closed binary complex）； 3.全酶紧密地结合在-10序列处，模板 DNA局部变性，形成开链式的启动子二元复合物(open binary complex) ； 4. 酶移动到+1,连续合成6-9个核苷酸,σ因子释放,形成酶-DNA-RNA三元复合物（ternary complex）。 转录的起始过程: 二. 原核生物转录的延长 RNApol酶上有两个核苷酸位点:一个起始核苷酸位点；一个延长核苷酸位点。 嘌呤核苷三磷酸充填了起始位点，另一个核苷三磷酸充填延长位点并均与模板碱基互补，才合成第一个磷酸二酯键 三、原核生物转录的终止 不依赖ρ因子的转录终止 依赖ρ因子的转录终止 RNA Po