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铁皮石斛组培苗生根条件优化的研究 　　摘 要 以铁皮石斛无菌幼苗为材料，在不同生根培养基中添加不同配比的生长调节物质、香蕉汁、马铃薯汁以及活性炭，研究其对铁皮石斛组培苗生根效果的影响。研究结果表明，生根培养基为：1/2 MS+6-BA 0.2 mg/L+10.0%香蕉汁+10.0%马铃薯汁+NAA 0.4 mg/L+2.0%蔗糖+0.04%活性炭，生根条件为光照强度2 000 lx、琼脂用量7.0 g/L、培养基pH为5.8是最适宜条件。 　　关键词 铁皮石斛 ；组培苗 ；生根条件 ；优化 　　分类号 S567.23+9 　　铁皮石斛（Dendrobium officinale） 为兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium sw.）植物，是一种十分珍贵的中药材植物，主要分布于我国云南、广西、广东、贵州等南方省区[1]。铁皮石斛是《中华人民共和国药典》收录的5种石斛属植物之一[2]。铁皮石斛具有较高的药用价值，《中国药学大词典》称其具有“滋养阴津”功效，清代《药性论》说石斛能补肾积精、养胃阴、益气力和增强体质。石斛作为益胃生津药在《神农本草经》、《本草再新》中均有记载[3]。现代医学对铁皮石斛的研究表明，多糖是一种有价值的中药类免疫增强剂。药理学研究表明，铁皮石斛的多糖、氨基酸、生物碱等成分，具有提高免疫功能、抗氧化、抑制肿瘤和降低血糖等作用[4-9]。但由于铁皮石斛生长条件十分苛刻，自然产量极少，加上生态破坏和药农的过度采挖，致使铁皮石斛野生资源的有些品种已面临灭绝的境地。野生石斛在自然条件下的繁殖率很低，林下移栽种植铁皮石斛成活的关键因素却是组培苗的生根壮苗，因此在组织培养过程中提高组培苗生根率尤为重要。 　　本文选择生长一致的的铁皮石斛组培瓶幼苗，研究不同生长调节物质浓度、不同添加物及浓度对铁皮石斛生根和生长的影响，以确定适合铁皮石斛壮苗生根最适宜的培养基，提高林下移栽铁皮石斛组培苗的成活率。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　铁皮石斛无菌试管幼苗由普洱茶研究院民族药膳实验室购进，选取3～4 cm无根或少量细根的铁皮石斛无菌试管幼苗为供试材料。 　　1.2 方法 　　1.2.1 培养条件 　　培养室温度26℃，湿度50%～60%，光照强度2 000 lx，每天光照12 h，培养基pH为5.8。 　　1.2.2 试验方法 　　在无菌条件下将材料取出，分别接种到所配制的生根壮苗培养基中。生根壮苗培养基设5个变量，分别是：6-BA、NAA、香蕉汁、马铃薯汁和活性炭。香蕉汁的制作方法是先按比例称取香蕉之后打成汁，而马铃薯汁是先按比例称取马铃薯后用水煮沸过滤出汁。每个处理培养基在1/2 MS基础中均加入20 g/L蔗糖、7 g/L琼脂，每处理接种10瓶，每瓶接种5株。培养1周后观察统计幼苗的成活情况，并进行测量计算生根率、生根数、根长和苗高，取其平均值进行数据比较，分析不同培养基对铁皮石斛生长情况的影响。 　　基本培养基均为1/2MS。 　　1.2.2.1 不同浓度6-BA对铁皮石斛的生根生长的影响 　　变量6-BA的量为0.1、0.2、0.3、0.4 mg/L。 　　培养基其他添加物为香蕉汁6.0%+马铃薯汁6.0%+活性炭0.2%+琼脂7.0 g/L+蔗糖2.0%。 　　生长调节物质NAA 0.2 mg/L。 　　编号分别为S1，S2，S3，S4。 　　1.2.2.2 不同浓度NAA对铁皮石斛的生根生长的影响 　　变量NAA的量为0.2、0.4、0.6、0.8 mg/L。 　　培养基其他添加物为：香蕉汁6.0%+马铃薯汁6.0%+活性炭0.2%+琼脂7.0 g/L+蔗糖2.0%。 　　生长调节物质6-BA0.3 mg/L。 　　编号分别为S5，S6，S7，S8。 　　1.2.2.3 不同浓度香蕉汁对铁皮石斛的生根生长的影响 　　变量香蕉汁的比例为6.0%，8.0%，10.0%，12.0%。 　　培养基其他添加物马铃薯汁6.0%+蔗糖2.0%+活性炭0.2%+琼脂7.0g/L。 　　生长调节物质NAA 0.6 mg/L+6-BA 0.3 mg/L。 　　编号分别为S9，S10，S11，S12。 　　1.2.2.4 不同浓度马铃薯汁对铁皮石斛的生根生长的影响 　　变量马铃薯汁的比例为6.0%，8.0%，10.0%，12.0%。 　　培养基其他添加物香蕉汁10.0%+蔗糖2.0%+活性炭0.2%+琼脂7.0g/L。 　　生长调节物质NAA 0.6 mg/L+6-BA 0.3 mg/L。 　　编号分别为S13，S14，S15，S16。 　　1.2.2.5 不同浓度活性炭对铁皮石斛的生根生长的影响 　　变量活性炭的量为0.0%，0.1%，0