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淡豆豉中不同成分对高脂糖尿病大鼠肝脏和脂肪系数的影响*
葛喜珍1,葛喜亮2,郑来丽3,王鑫3,田平芳3**
(1.北京联合大学生物化学工程学院,北京100023;
2.河北辛集市第一医院 河北辛集 052300;
3北京化工大学生命科学与技术学院 北京 100029)
摘要 目的:淡豆豉中不同成分对高脂糖尿病大鼠脂肪代谢的影响。方法:Wistar大鼠采用高脂高糖罐胃同时腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型。将动物随机分为正常对照组、模型组、淡豆豉水提物(8g生药.kg-1.d-1),淡豆豉多糖(0.5g.kg-1.d-1)和淡豆豉异黄酮组(2g.kg-1.d-1)。给药四周后处死大鼠,取血清测定总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、游离脂肪酸、MDA和脂肪指数。结果:与正常组比较,模型组总胆固醇、甘油三酯、游离脂肪酸和脂肪指数水平明显升高(P 0.05,P 0.01),高密度脂蛋白胆固醇、SOD水平明显降低(P 0.01)。与模型组比较,治疗组各项指标有明显改善(P 0.05, P 0.01)。结论:淡豆豉提取液能调节高脂糖尿大鼠血脂,并降低脂肪指数,其中的主要成分淡豆豉异黄酮作用最明显,淡豆豉多糖次之。
关键词 淡豆豉 ;多糖;异黄酮;血脂;高脂糖尿病
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:
Ⅱ型糖尿病(diabetesmellitus,DM)患者除血糖升高外,还普遍存在有脂代谢紊乱、肥胖等,主要表现为血甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(FFA)水平的升高、腹部脂肪增加[1]。研究证明,淡豆豉正丁醇萃取部分能改善糖尿病小鼠降糖[2],且淡豆豉具有α-葡萄糖苷酶抑制作用,为探讨其中其作用的有效成份及其对Ⅱ型糖尿病大鼠减肥作用,本研究分别分离了其中的异黄酮部分、多糖部分与水提物,观察其对高脂糖尿病大鼠血脂和脂肪指数的影响。
1.1 实验动物
清洁级wistar雄性大鼠,体重150-200g,由军事科学动物中心提供。许可证号:SCXK-(军)2002-001。
*基金项目:北京市教育委员会科技发展计划资助项目(KM200611417013);北京市人才引进计划项目。
**通讯联系人:田平芳,博士,副教授,研究方向为天然产物。北京朝阳区北三环东路15号北京化工大学53信箱 100029
E-mail:tianpingfang@163.com tel:010作者简介:葛喜珍(1968- ),副教授,女(汉族),河北平山人,现为北京联合大学副教授,博士学位,主要从事中药对糖尿病的防治研究.
1.2 实验仪器
TGL-16C低速离心机:上海安亭科学仪器厂;Thermo MK3型酶标仪:热电(上海)仪器有限公司;scoutⅡ半自动生化仪:德国scout公司;优越型血糖测试仪:德国罗氏公司。
1.3 药物与试剂
链脲佐菌素(streptozotocin,STZ):sigma公司。胆固醇、胆酸钠、蛋黄粉(北京奥博星生物技术责任有限公司),猪油(自制),淡豆豉(河北安国长安药材加工厂,经联合大学生物化学工程学院制药工程教研组鉴定为正品)。甘油三酯(TG)、高度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总胆固醇(TC)试剂盒:中生北控生物科技股份有限公司。游离脂肪酸(FFA)试剂盒:南京建成生物工程研究所。
2 方法
2.1提取物制备:脱脂淡豆豉,用蒸馏水煎煮得水提液(相当于0.5g药材.ml-1)。脱脂淡豆豉超声波提取,除杂蛋白,得大豆异黄酮浓缩液,其中染料木苷(1076.80μg.g-1),大豆苷元(310.48μg.g-1)和 染料木素(141.93μg.g-1)。合并滤渣,蒸馏水超声提取豆豉多糖(0.91%)。
2.2 动物分组与高脂糖尿病大鼠模型建立
高脂乳剂配方:200g猪油加热溶化,加入100g胆固醇,待溶化后加入20g胆酸钠,300g蔗糖,充分搅匀后加入200ml吐温80,200ml丙二醇及适量蒸馏水,搅拌,待溶解后冷却至室温再加适量蒸馏水至1500ml并充分混匀,4℃封存,用时37℃水浴加热溶化。
清洁级wistar雄性大鼠60只,适应性喂养一周。随机选取10只为正常对照组,灌胃自来水,其余50只灌胃高脂乳剂饲料10ml.kg-1。四周后除正常组外,各组均腹腔注射STZ 40mg.kg-1。3天后尾静脉取血测血糖,取空腹血糖大于11.1mmol.L-1的42只大鼠入选糖尿病模型。将42只大鼠随机分为:高脂饲料组(模型组)、淡豆豉水提物组(水提液,8g生药.kg-1.d-1)、淡豆豉异黄酮组(2g淡豆豉异黄酮.kg-1.d-1)和淡豆豉多糖组(0.5g.多糖kg-1.d-1)。正常对照组喂普遍饲料,同时每天灌喂自来水;其它各组在继续灌胃高
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