《寒兰离体化学诱变研究论文》-毕业学术论文设计.docVIP

摘要 PAGE PAGE 87 2007年学位论文盲审抽检 2007年 学位论文盲审抽检 编号： 论 文 题 目 寒兰离体化学诱变研究 The Research on Chemical Mutation in Vitro of Cymbidium Kanran Makino 专业名称： 植物学 专业代码： 071001 种类（在相应方框内打√）： 统招博士□ 统招硕士□同等学力人员申请硕士学位□ 工程硕士□ 高校教师在职攻读硕士学位□ 公共管理□ 工商管理□ 摘要 本文以甲基磺酸乙酯(EMS)、硫酸二乙酯(DES)、秋水仙素(colchicines)、咖啡碱(caffein)、5-溴尿嘧啶(5-BU)、马来酰肼(MH)、亚硫酸钠(Na2SO3)为化学诱变剂，以寒兰(Cymbidium kanran Makino)原球茎为材料进行离体化学诱变研究，探讨这7种化学诱变剂对寒兰原球茎生长、增殖和分化的效应，筛选适宜的诱变浓度和时间，以形态学方法鉴定再生植株的表型变异，以细胞学方法观察化学诱变剂对寒兰根尖细胞核的影响，并分析诱变后的再生植株在生理生化指标的变化，以ISSR–PCR 扩增体系对化学诱变剂造成的寒兰遗传物质的改变进行了初步分析。结果表明： 1. 各化学诱变剂对寒兰原球茎的生长均有一定的抑制作用，随着浓度升高或时间的延长，原球茎的褐变率和死亡率升高，褐变率始终小于死亡率。 2. 各化学诱变剂对寒兰原球茎的增殖均有一定的抑制作用，随着浓度升高或时间的延长，原球茎的死亡率升高。增殖率和绝对生长速度的变化与处理浓度和时间之间并非简单的相关关系。 3. 通过对各处理结果的分析，计算了7种诱变剂对寒兰原球茎的半致死量，它与浓度和时间都有关系，可作为寒兰离体化学诱变的参考剂量。 4. 再生植株在表型上均有一定的变异，主要以叶色变黄为主。其中EMS和秋水仙素处理后原球茎的再生植株表型变异显著，但是表型变异再生植株的比率并不高。 5. 各化学诱变剂都能在细胞学水平对寒兰根尖细胞核造成明显改变，主要有畸形核、微核、多核、核破裂、核质浓缩、染色体畸变(加倍、滞后、缺失)等现象。 6. 再生植株可溶性糖含量较正常植株有不同程度的升高；EMS、DES、秋水仙素和Na2SO3处理后的原球茎再生植株的可溶性蛋白含量增高，咖啡碱、5-BU、马来酰肼处理后的原球茎再生植株的可溶性蛋白含量降低。 7. 再生植株的可溶性蛋白质图谱、超氧物歧化酶同工酶酶谱、酯酶同工酶酶谱、过氧化氢酶同工酶酶谱、过氧化物酶同工酶酶谱较正常植株有不同程度的变化，存在条带的减少和增加现象。 8. 再生植株和正常植株之间的基因组ISSR扩增图谱条带均有差异性，其中EMS、DES、5-BU诱变处理后再生植株的基因组扩增条带差异性较其他诱变剂的明显。 关键词：寒兰；原球茎；化学诱变 ABSTRACT Using EMS, DES, colchicines, caffeine, 5-BU, MH, Na2SO3 as mutagenic agents, and using the PLBs of Cymbidium kanran Makino as material, we studied the tech- nique of mutagen in vitro. This article researched the effects on growth, proliferation and differentiation of PLBs treated with mutagenic agents, chosed appropriate concentration and time, used technique of morphologic to check up phenotypic mutation, used cytological technique to observe the influences on karyons of root tip, analyzed the physiological and biochemical change of plants from PLBs treated with mutagenic agents, at last, used ISSR–PCR amplified system to analyze the change on genome of plants from PLBs treated with mutagenic agents. The results were as follows: Each muta