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SLC22A3基因负性调控元件的定位
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黄 博 ，柳 青 ，雷家俨 ，丁艳辉 ，封 雪 ， 雷 寒
（重庆医科大学1.附属第一医院临床研究中心；2.附属第一医院心血管内科，重庆 400016 ；3.附属大学城医
院检验科，重庆 401331 ）
【摘 要】目的:拟寻找和确定人第 6 号染色体 q26-q27 区域的SLC22A3 基因 intron7 序列中具有重要负性调
控功能的核心调控元件的具体序列位置。方法:用基因重组的方法,分别构建 intron7 截短型野生重组质粒，分
段查找该负性调控元件的具体序列位置。以包含人 SLC22A3 基因全长序列的细菌人工染色体为模板,PCR 扩
增所需截短型片段,分别插入荧光素酶报告基因载体 pGL3-Promoter,将重组质粒与内参质粒 pRL-SV40 以 50:1
的比例共转染HEK293T 细胞,24 h 后检测荧光素酶活性(luciferase activity),通过对比重组质粒和pGL3-Promot
er 荧光素酶活性,判断插入片段是否具有调控作用,并对发现的元件进行转录因子结合位点预测。结果：截短型
野生重组质粒 pGL3-pro-SLCi7-NO6,pGL3-pro-SLCi7-NO10,pGL3-pro-SLCi7-NO6.2,pGL3-pro-SLCi7-NO6.3,p-
GL3-pro-SLCi7-NO10.2,pGL3-pro-SLCi7-NO6.21,pGL3-pro-SLCi7-NO10.22 各组荧光素酶活性较 pGL3-Promot
er 组降低(P0.05) ；而截短型野生重组质粒pGL3-pro-SLCi7-NO6.21-300 bp(P0.05)和pGL3-pro-SLCi7-NO10.
22-300 bp(P0.05)组荧光素酶活性较 pGL3-Promoter 组无统计学差异 ；结论:人类第 6 号染色体 q26-q27 区域
的 SLC22A3 基因 intron7 序列中存在 2 个负性调控元件,为今后进一步对 SLC22A3 基因蛋表达调控方面的研
究提供了理论依据。
【关键词】冠心病；SLC22A3基因；负性调控元件；荧光素酶活性
【中图分类号】R541.4 【文献标志码】A 【收稿日期】2015-04-16
Identification of negative regulatory element in SLC22A3 gene
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Huang Bo ，Liu Qing ，Lei Jiayan ，Ding Yanhui ，Feng Xue ，Lei Han
（ 1.Department of Clinical Research Center；2.Department of Cardiology,The First Affiliated
Hospital of Chongqing Medical University ；3.Department of Laboratory Medicine，The
University-Town Hospital of Chongqing Medical University ）
【Abstract 】 Objective: To research and ident
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