医疗医学细胞培养技术.pptVIP

试剂标注规范 试剂名称 NaCl 配制浓度 0.5 mM 配制人 张三 配制日期 2016.10.21 细胞复苏（快融） （l）从液氮中取出冷冻管，迅速投入37℃水浴中，使其融化（1分钟左右）。并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。 （2）用培养液稀释后低速离心10分钟。 （3）去上清，加新鲜培养液培养刚复苏的细胞。 （4）隔天换液，但贴壁细胞若未贴壁则勿需处理。 复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶而损伤细胞。 细胞传代 ? ? 细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。 传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。 细胞传代 1 悬浮细胞传代 离心法传代：离心（1000转/分）去上清，沉淀物加新培养液后再混匀传代。 直接传代法：悬浮细胞沉淀在瓶底时，将上清培养液去除l／2一2／3，然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。 2 半贴壁细胞传代（Hela细胞） 此类细胞部分呈现贴壁生长现象，但贴壁不牢，可用直接吹打法使细胞从瓶壁脱落下来，进行传代。 离心 新鲜培养基悬浮 铺板 细胞传代 3 贴壁细胞传代 采