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解析:操作的前后都要对接种环进行灭菌。划线操作需在火焰旁进行,而不是在火焰上;所有的划线区都有可能得到所需菌落,只是5区得到的菌落相对较纯。 答案: D 考点二 目标微生物的筛选与培养 考情解读 目标微生物的筛选是微生物应用的前提,相关技术广泛应用于微生物实验室培养及发酵工业生产实践中,本考点也常作为热点内容呈现在各地高考试卷中,考查点着重于选择培养基的制备、目标微生物的分离流程、对照实验的设置等,2013年备考应格外关注。 [做一题] [例2] 从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。 (1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是 从合适的环境中采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯 化。培养嗜盐菌的菌样应从 ________ 环境中采集。 (2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境 条件,使其数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养 方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择 ______________ 的培养基,并在 ________ 条件下培养。 (3)下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后 培养的效果图解,请分析接种的具体方法。 获得图A效果的接种方法是 ________ ,获得图B效果的接种方法是 ________ 。 (4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行 ______,接种前要进行________ ,在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在 ________ 条件下进行。 [解析] (1)嗜盐菌就生活在高盐环境中,如海滩等环境。(2)耐高温淀粉酶应存在于以淀粉为唯一碳源且在高温环境中生存的微生物体内。(3)从菌落分布的特点可以看出,A纯化微生物的接种方法是稀释涂布平板法,B纯化微生物的接种方法是平板划线法。(4)培养基配制时应先溶化,再调整pH值,然后灭菌。 [答案] (1)海滩等高盐 (2)以淀粉为唯一碳源 高温 (3)稀释涂布平板法 平板划线法 (4)pH调整 高压蒸汽灭菌 无菌 [链一串] 1.几种典型微生物的筛选方法 (1)培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。 (2)培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。 (3)培养基中缺乏氮源时,可以分离固氮微生物,因为非 固氮微生物不能在此培养基上生存。 (4)当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有 分离效果。如当石油是唯一碳源时,可以抑制不能利用石油的微生物的生长,使能够利用石油的微生物生存,达到分离能消除石油污染的微生物的目的。 (5)改变微生物的培养条件,也可以达到分离微生物的目 的,如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。 2.微生物筛选过程中必要的两种对照培养基及其作用 对照组 作用 现象 结论 未接种 培养基 有无杂菌污染的判断 未接种的培养皿中无菌落生长 未被杂菌污染 接种的 牛肉膏 蛋白胨 培养基 选择培养基筛选作用的确认 牛肉膏培养基上的菌落数大于选择培养基上的数目 选择培养基具有筛选作用 [关键一点] 即使使用了选择培养基,所得到的微生物也未必全为“目标微生物”,因此,常需对选择培养基中菌落作进一步鉴定。 [通一类] 2.下表为培养某种微生物的培养基配方,下列相关叙述 错误的是 ( ) 成分 NaNO3 K2HPO4 KCl MgSO4·7H2O FeSO4 (CH2O) H2O 青霉素 含量 3 g 1 g 0.5 g 0.5 g 0.01 g 30 g 1 000 mL 0.1万单位 A.依物理性质划分,该培养基属于液体培养基 B.依用途划分,该培养基属于选择培养基 C.培养基中的唯一碳源是(CH2O),唯 一氮源是NaNO3 D.若用该培养基培养纤维素分解菌,则应除去(CH2O), 再添加纤维素 解析:由于配方中没有琼脂,所以从物理性质上划分为液体培养基;由于配方中含有青霉素,对微生物有一定的筛选作用,所以从用途上划分为选择培养基;由于培养基中含有青霉素,纤维素分解菌不能生存,除去(CH2O)外,还应除去青霉素,同时添加纤维素和琼脂。 答案: D 3.苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在 着能降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如下图所示,①为土壤样品。下列相关叙述错误的是 ( ) A.图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为 碳源 B.如果要测定②中活细菌数量,常采用稀释涂布平板法 C.若图中④为对照实验,则其中应以苯酚作为唯一的碳 源 D.使用平板划线法可以在⑥上获得单菌落 解析:用苯酚作为选择培养基
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