微生物生长繁殖与生存因子分析.pptx

第五章 微生物的生长繁殖与生存因子;第一节 微生物的生长繁殖;微生物在适宜的环境条件下，不断吸收营养物质，进行新陈代谢。如果同化作用大于异化作用，则表现为微生物个体生长，到一定阶段开始分裂，微生物个体数量增多，表现为群体生长。 微生物生长通常是指群体的增长。;菌名;一、微生物生长量测定方法;计数器直接计数 电子计数器计数 染色涂片计数 比浊法 ; 1．计数器测定法;如125个小格中有90个细菌则 (90÷125) ÷0.0025=288个/ml。 这种方法只能测定个体较大微生物，个体若太小，则由于每一小格中细菌层层叠加，相互遮挡，难以准确计数。;9;3.涂片染色法 ; 涂片染色法; 4．比浊计数法; （1）制标准曲线;14;（二）测定活细菌数;1.平板计数法;17;一般计数平板的细菌生长菌落数以30~300个为宜。 细菌数量=数出的菌落数/稀释度 例如：10-5稀释度时菌落数为100个，则细菌数量=100/10-5=107个/mL 平板计数法是采用最广的一种活菌计数法。 ;2.稀释培养计数（MPN法）;测定硫酸盐还原菌的数量;（1）10倍梯度稀释;(3)统计、查表、计算 ;MPN三管法测数统计表;3. 过滤计数法;26;(三)计算生长量;1.测定细胞干重法 测定干重时，先将细菌分离，再烘干称量。分离可采用离心法或过滤法。取已经培养一段时间的待测样品，用离心机收集生长后的细菌细胞，或用滤纸、滤膜过滤截取生长后的细菌细胞，然后在105~110℃下进行干燥，称取干燥后重量，以此代表细菌生长量。;水处理工程设施中的细菌生长量通常采用这种细胞干重测定法。这种方法实际上测得的是水中悬浮物重量，如果水中非细菌类的悬浮物很多的话，势必会严重干扰细菌计数的结果。;2.细胞含N量法;凯氏定氮法 Kjeldahl determination 定义：测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收，再以标准碱滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。 ;;33;;35;;3.DNA含量法;提问：当你需要测定某水样中细菌数量时，你该如???选择方法？;二、研究微生物生长的方法;（一）分批培养和生长曲线 ; 生长曲线; （1）停滞期; 应用; （2）对数期; ①特点; ②细菌代时的计算;在对数期分别测定t0时刻与t时间细菌的数量X0与X，基于细菌的二分裂生长。 t0 t 1→2→22→23（（22）×2）→24→25… … 2n X0→……X0·24→……X0·2n (n=1、2、3…) X n是细菌的代数 ; （3）静止期; 特征; （4）衰亡期;特点;衰亡期的长短与对数生长期一样在不同微生物中变化是很大的，主要与菌种的遗传特性有关。 通过补充营养和能源，以及中和环境毒性，可以减缓死亡期的细胞死亡速率，延长细菌培养物的存活时间。;（二） 连续培养; （1）恒浊连续培养 ;（2）恒化连续培养 ;56;;第五章 微生物的生长繁殖与生存因子;一.温度;适宜温度;不同细菌的生长适宜温度;废水中的细菌一般都是嗜中温菌，最适温度 多在30℃左右，嗜冷菌和嗜热菌占少数。; 嗜热菌 最适50-60℃,在堆肥、温泉中存在。 在地中海发现一属嗜超热菌，叫火球菌属，最适生长温度高达105℃。 ;嗜中温微生物 自然界中绝大多数是如此。;嗜冷菌 最适生长温度5-10℃，如荧光极毛杆菌可在-4℃生长.;耶尔森氏菌在0-4℃环境中生长 ，广泛存在于各种动物体内，以及蔬菜、水果等食品上。 熟食品存放在冰箱中不能超过3天；如小孩吃吞感染食品后，则肠胃不舒服，胀鼓，无胃口。;(二)温度对微生物生长影响;1.高温灭菌法;2.湿热灭菌; A 高压蒸汽灭菌法：121℃常用30′ B 常压蒸汽灭菌法：100℃ 常6-8hrs C 煮沸消毒法：100℃ 15′可杀死所有营养细胞，部分芽孢。;3.间歇灭菌法;4.巴氏消毒法（低温消毒法）;1.低于冰点的温度能杀死微生物 原因： A、细胞体内水分转变成冰晶，引起细胞明显脱水； B、冰晶对细胞结构尤其是细胞质膜的物理损伤。 采用快速冷冻或细胞悬液中加入保护剂，可以减少冰冻对细胞的损害。 由于低温菌的活动，常导致食物变质。温度愈低腐败愈慢。;2.低温可延缓微生物的生理活动