类肌肽4-丙氨酰胺-5-羧酸咪唑的酶促合成及表征.PDFVIP

生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2009, December 25; 25(12): 1940-1947 Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@ © 2009 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved 研究报告 4(5)--5(4)- 1 1 2 周小华 , 苏霞利 , 陆瑶 1 , 400030 2 , 643000 : 肌肽(β-Ala-L-His)是一种高效抗氧化剂, 广泛应用于生物、化工、医药等领域。应用微水相酶促合成类肌肽, 效 率高价格低, 且具有相似性质, 开发前景广阔。本研究以L- 丙氨酸和4,5-二羧酸咪唑制备类肌肽4(5)- 丙氨酰胺-5(4)-羧 酸咪唑, 正交实验下的最佳合成条件为: 四氢呋喃:pH 8 磷酸缓冲溶液＝10:1.6 (V/ V), L- 丙氨酸:4,5-二羧酸咪唑=1:3 (m/m), α-胰凝乳蛋白酶:底物=1:200(m/m), 35oC 下磁力搅拌 1.5 h。硅胶G60 薄层色谱(TLC)分离反应产物, R =0.81 处出 f 现新斑点; 刮下该点纯化后进行紫外扫描, 高效液相色谱(HPLC) 和核磁共振, 紫外光谱 253 nm 处吸收明显增强, 310 nm 处出现新吸收峰; 253 nm、310 nm 、330 nm 高效液相色谱保留时间均为4.0 min; 13C 核磁共振显示 8 组碳原子。 结合胰凝乳蛋白酶的催化机理, 得出产物结构为4(5)- 丙氨酰胺-5(4)-羧酸咪唑。 : 类肌肽, 4(5)- 丙氨酰胺-5(4)-羧酸咪唑, α-胰凝乳蛋白酶, 非水相, 合成 Enzymetic synthesis and characterization of a carnosine analogue in non-aqueous solvent 1 1 2 Xiaohua Zhou , Xiali Su , and Yao Lu 1 College of Chemistry and Chemical Engineering, Chongqing University, Chongqing 400030, China 2 Department of Materials , Sichuan Arts and Science University, Zigong 643000, China Abstract: Carnosine (β-Ala-L-His) has high antioxidant activity, and it is widely used in biology, chemical engineering, medicine and other fields. Its analogue syntheised in non-aqueous solvent and catalyzed by enzymes is high-effective