对虾养殖体系中细菌群体感应抑制菌株的筛选及其特性初步研究.PDF

第 14 卷第 1 期 南 方 水 产 科 学 Vol.14 ，No.1 2 0 1 8 年 2 月 South China Fisheries Science Feb. ，2018 doi: 10.3969/j.issn.2095 – 0780.2018.01.004 对虾养殖体系中细菌群体感应抑制菌株的 筛选及其特性初步研究 1 1 2 1 韦 存 ，于 鹏 ，于明超，单洪伟 （1. 海水养殖教育部重点实验室(中国海洋大学) ，山东 青岛 266003 ； 2. 通威股份有限公司，四川 成都 610041 ） 摘要： 从对虾养殖环境及肠道内筛选能够抑制细菌群体感应的活性菌株，并探讨了影响菌株活性的环境因素及其 对病原坎氏弧菌( Vibrio campbellii) 毒力基因表达的影响。采用滤纸片法和高通量法对分离出的纯化菌株进行筛 选，获得活性菌株。评估不同培养时间和盐度对活性菌株降解N-酰基高丝氨酸内酯类(AHLs) 信号分子能力的 影响，并检测活性菌株粗提物对坎氏弧菌毒力基因toxR 和tlh mRNA 表达的影响。分离得到2 株活性菌株 DC13 和RS5 ，经 16S rRNA 基因序列分析，初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 和巨大芽孢杆菌(B. megaterium) 。AHLs 信号分子对活性菌株生长无显著性影响(P0.05) 。菌株DC13 培养24 h 后降解AHLs 信号分 子能力达到最大值，菌株RS 5 培养 12~48 h 降解AHL s 信号分子能力无显著变化。盐度 10~30 时对菌株 DC13 降解AHLs 信号分子能力无显著性影响，但是对菌株RS5 降解AHLs 信号分子能力影响显著(P0.05) 。活 性菌株粗提物的添加使坎氏弧菌毒力基因toxR 的表达上调，而毒力基因tlh 的表达下调。 关键词： 水产养殖；细菌性病害防治；群体感应；AHLs ；毒力基因 + 中图分类号： S 966.12 9 文献标志码： A 文章编号： 2095 − 0780 − （2018 ）01 − 0027 − 08 Preliminary study of screening and characteristics of strains with Quorum sensing inhibition activity in shrimp culture environment 1 1 2 1 WEI Cun , YU Peng , YU Mingchao , SHAN Hongwei (1. Key Laboratory of Mariculture (Ocean University of China), Ministry of Education, Qingdao 266003, China; 2. Tongwei Co., Ltd., Chengdu 610041, China) Abstract: We screened the active strains with Quorum sensing inhibition activity in