经鼻腔黏膜免疫途径投递防龋DNA疫苗的研究进展.docVIP

经鼻腔黏膜免疫途径投递防龋DNA疫苗的研究进展 【 】20世纪90年代以来，因DNA疫苗具 有其它疫苗不可比拟的优点__免疫原性强，制备简 单，免疫应答持久，安全等特点，成为防龋疫苗的研 宄热点。为寻找免疫防龋的最佳途径，国内外许多学 者在多种免疫方法和途径上进行了研宄。唾液是口腔 局部抗感染的重要生理屏障。以分泌型IgA (slgA)作 为主要体液防御因子的黏膜免疫系统是机体抗感染的 第一道防线，在抵抗感染方面起着极其重要的作用。 而且实验证明通过黏膜免疫之后，黏膜局部的抗体比 血清抗体出现早、效价高，且维持时间长。鼻腔免疫 它不仅能避免肝脏的首过效应，有效地诱导黏膜局部 免疫和系统免疫应答，具有远隔共同黏膜效应，而且 与其它免疫途径相比更加简便、安全、文明，无创伤。 近年来鼻黏膜途径受到了基因免疫与基因治疗领域的 广泛关注，因而对经鼻腔黏膜途径免疫的方式进行深 入的研究，对将来防龋DNA疫苗的临床应用具有重要 的意义。 【关键词】DNA疫苗;表面蛋白抗原;葡糖基转移 酶;葡聚糖结合蛋白;阳离子脂质体;壳聚糖纳米基因 【 】R392【 】A【文章 编号】1008-6455 (2011)12-0583-02 1鼻腔黏膜免疫及免疫机制的研究 随着对黏膜免疫系统研宄的深入，目前唾液抗体 被认为是防龋的主要屏障，其中发挥作用的主要是 S-lgA, S-lgA 是共同黏膜系统 Hl3 (common mucosal immune system, CMIS)产生的含量最多、最主要的抗 体型，占黏膜相关组织产生的所有抗体的80%。防龋 疫苗抑制龋病的主要机制在于诱导机体产生特异性 S-lgA抗体。 黏膜免疫常用途径包括鼻腔黏膜、胃肠道黏膜、 生殖道黏膜、呼吸道黏膜等。与经口服免疫相比，鼻 黏膜诱导免疫应答所需的抗原量低于前者，而且避免 抗原暴露在胃肠道恶劣的环境中，包括酸性环境，降 解酶等。与生殖道黏膜和胃肠道粘黏膜途径相比，鼻 黏膜途径更文明，更容易操作，更容易被接受。所以， 鼻黏膜途径受到了基因免疫与基因治疗领域的广泛关 注。近年来，鼻腔黏膜免疫已成为继口服免疫后诱导 黏膜免疫应答的又一有效途径。 Childers等比较了将GTF和PAc的混合制备物喷雾 法给人接种鼻腔或扁桃体，均诱导出了唾液和鼻腔分 泌物中的特异性S-lgA抗体，并以鼻腔的免疫效果最好 C23o Smith等单独用GTF经鼻免疫SD大鼠，诱导出 唾液中特异性抗体S-lgA H33。王晶、刘建国、杨德琴 等H4〗用变形链球菌防龋基因疫苗pcDNA3tfB经鼻 腔黏膜免疫日本长耳大白兔后的免疫反应性，实验结 果证明鼻粘膜免疫途径是一种方便有效的途径。 2鼻黏膜裸质粒免疫效果的实验研宄 有研宄表明鼻黏膜免疫可能是最有效的既能诱发 黏膜免疫反应，同时又能诱发系统免疫反应的接种途 径K52。有学者研究K62，DNA疫苗经鼻黏膜免疫后， 可使质粒快速地分布于全身多种组织包括肺脏、脾脏、 肾脏等，并在接种后24小时可在CLN、MLN、ILN等 多处淋巴结检测到其mRNA的转录。但目前DNA疫苗 黏膜免疫的机制仍不清楚。Tadokoro等H7〗考察了 鼻内接种DNA疫苗后的组织定位和表达动力学，接种 后2?4周进行的荧光原位杂交检测表明，在肺、肝、 肾、脾、局部淋巴结、胚胎和食道中均检测到质粒的 存在，在肺、肝和脾中能够检测到特异的mRNA，而 在肺部能够检测到特异蛋白。Kuklin等K8〗研宄发现 编码0 -半乳糖苷酶和3 -Gal protein的质粒DNA,经鼻 腔内免疫后，可在牙槽骨、上皮细胞、支气管和颈部 淋巴结中检测到外源蛋白的表达。上述研宄结果为解 释通过鼻内接种能够诱导较强的免疫反应提供了重要 信息。 李宇红等U93比较三种防龋DNA疫苗经肌肉、 黏膜两种途径的免疫防龋效果，发现经黏膜免疫诱导 唾液S-lgA水平较高，对防龋更为有意义。张睿等〖103 观察重组质粒pCIA-P经鼻黏膜和颂下腺区皮下注射法 免疫BALB/c小鼠发现滴鼻法比皮下注射法诱导唾液 IgA型特异性抗体要早，并可持续较长时间，而且该 方法简单易行，是相对安全有效的黏膜免疫途径。郭 继华等K113的研究证实pCIA-P DNA防龋疫苗经鼻黏 膜途径进行免疫可以有效预防龋病的发生。 3增强鼻黏膜免疫效果的实验研宄 3.1壳聚糖:为了提高防龋DNA疫苗经鼻黏膜免 疫的效果,卫克文、樊明文等K122用壳聚糖与PCDNA3.1 (+) /gbpB形成纳米颗粒，成功构建了以葡聚糖结 合蛋白B基因为免疫原的纳米基因防龋疫苗，经鼻免 疫SD大鼠检测了壳聚糖经鼻免疫的佐剂效能。壳聚 糖载体机理集中于它的助渗作用、生物粘附作用。它 增加细胞的渗透力是通过影响上皮细胞的细胞间 (paracellular)和细胞内(