重组多杀性巴氏杆菌细菌幽灵的-研究.pdf

摘要 摘 要 多杀性巴氏杆菌是几种动物的重要病原菌，目前已经发现本菌有5种不同 的荚膜型和16种菌体型。引起牛和水牛出血性败血症的为B：2和E：2型，引起 禽霍乱的为A：I和A：3型，在我国导致猪肺疫的菌株为B型，而国外致猪肺疫 的是A型。能够产生皮肤坏死毒素的A型和D型菌株是猪传染性萎缩性鼻炎的 重要病原菌之一，F型菌株则引起火鸡不同程度的疾病。近年来，我国猪群由A 型多杀性巴氏杆菌引起的猪肺炎病例逐渐增多。控制上述这些疾病的有效手段 是免疫预防，但目前所有多杀性巴氏杆菌的疫苗都存在着免疫期短和保护率相 对偏低的问题。同种弱毒活疫苗比灭活疫苗免疫效力相对高些，这就预示着灭 活疫苗在制备过程中的抗原决定族可能被物理和化学处理而破坏。通过遗传灭 活方法是保持天然抗原决定族的有效手段。为此，我们采用基因工程手段，从含 有E基因的质粒pHH43中提取E基因，并将其克隆到适合转化野生型革兰氏阴性 100多克隆区，从而构建新的裂解决质粒，并以目前对养殖业 菌的穿梭质粒pPBAl 危害较大的多杀性巴氏杆菌致病毒株为转化对象，构建细菌幽灵重组菌株。通 过比色法、CFU和扫描电镜等分析，了解E裂解基因