鸡新城疫病毒HN09-69株主要基因的克隆、原核表达与鉴定.pdf

摘要 摘要 新城疫(Newcastle disease disease．ND)是由新城疫病毒(Newcastlevirus，NDV)2J[起禽的高 度接触性传染病，主要引起呼吸道，神经系统或肠道病变。NDV是单股负链的RNA病毒， 为副黏病毒科副黏病毒亚科禽腮腺炎病毒属中的一个成员，基因组编码NP、P、M、F、HN、 L6种主要结构蛋白。另外，P基因可以通过“RNA编辑”方式编码产生额外的两个非结构蛋 白—-V蛋白和W蛋白。从1926年发现该病以来，NDV传播到世界各个国家和地区，并对 世界养禽业及国际贸易造成巨大的经济损失。2009年本实验室从中牟某发病鸡场采集病料， 并经病毒分离、鉴定和致病性实验，证明病原为强毒NDV，并命名为HN09．69株。本试验 以HN09．69分离株为研究对象，对主要基因分别进行了克隆、原核表达及鉴定。 首先根据GenBank录入的NDV的各基因组序列设计5对引物，运用RT．PCR技术从 HN09-69分离株的基因组中分别扩增出NP、P、M、F、HN基因的全长ORF序列并测序。 对NP、P、M、F、HN基因核苷酸同源性