鸡AvBD7成熟肽在大肠杆菌中的表达与抗菌活性分析.pdf

摘 要 AvBD7成熟肽是一种拥有42个氨基酸残基的鸡B一防御素，属于阳离子抗菌 aIltimicrobial 多肽(Cationic p印tides，C√WPs)，是鸡体内先天性和获得性免疫的 重要成分。它具有抑菌谱广、抗菌力强且不易使病原微生物产生抗药性等优点， 是一种具有非常良好应用前景的“抗生素替代品”，如何对其进行大规模生产应 用己成为目前的研究热点。 为了探索鸡B．防御素在大肠杆菌表达系统中的表达水平及体外抑菌活性情 况，本研究以鸡A：vBD7作为研究对象，应用基因工程技术，将人工合成的 pGEx一6P√l馏ID7大肠杆菌工程菌。通过优化表达条件获得大量的可溶性融合蛋 肽具有较好的抗菌活性。具体研究内容和结果如下： 1．构建表达AvBD7成熟肽的大肠杆菌工程菌 AvBD7成熟肽基因序列，设计1对引物P1(5’端含有互泐RI酶切位点)和P2(5’端 含有勋，I酶切位点)用于PCR扩增鸡彳佃D7成熟肽基因片段，把PCR扩增出的 鸡AVBD7成熟肽基因片段和p饼Ⅸ．6P一1载体分别进行双酶切后连接，构建成功 pGEX．6P．】．一AVBD7成熟肽表达载体并转化大肠杆菌BL21(DE3)。 2．鸡A：vBD7成熟肽