实验二-菌涂(抹)片的制备和革兰氏染色.pptVIP

目的要求：1、掌握细菌抹片的制备方法和常用染色方法。????????????????2、认识革兰氏染色和抗酸性染色的反应特性。 实验内容： 1、? 细菌抹片的制备： 玻片准备：透明、洁净、无油渍。 抹片：液体材料、非液体材料、组织脏器材料的抹片方法讲解、示范。 干燥固定：火焰固定和化学固定的示范。讲解其目的及注意事项。 2、? 细菌涂片的制备：讲解并示范涂片、干燥、固定的方法。 3、? 细菌常用染色方法：革兰氏染色法 革兰氏染色法：1. 制片：取待检病料或细菌培养物常规抹（涂）片、干燥、固定。 2. 初染：滴加结晶紫，染色1-2分钟，水洗。 3. 媒染：用碘液冲去残水，并用碘液覆盖约1分钟，水洗。 4. 脱色：用滤纸吸取或甩去载玻片上的残水，将载玻片倾斜，在白色背景下，用滴管流加95%乙醇脱色，直至流出的乙醇无紫色时（20—30秒），立即水洗。 5.复染：用复红液复染约2分钟，水洗。6. 镜检：用滤纸吸水，干燥后，显微镜油镜观察。 革兰氏染色法原理： 革兰氏染色法将细菌分为G＋和G- ，这由两类细菌细胞壁的结构和组成的不同而决定。用结晶紫初染后，所有的细菌都染上蓝紫色。碘作为媒染剂能与结晶紫结合形成结晶紫-碘的复合物，增强了染料与菌体的结合力。用乙醇脱色处理时，两类细菌的脱色效果是不同的。G＋细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成，且壁厚、类脂含量