KT15基因多态性与壮族儿童单纯性肥胖的相关性研究.doc

KCTD15基因多态性与壮族儿童单纯性肥胖的相关性研宄 钟青燕唐宁李哲涛李红辉严提珍(通讯 ) (广丙柳州市妇幼保健院出牛.缺陷预防与控制重点实验室545001) 】目的探讨含钾通道四聚化结构域15 (KCTD15)基因单核苷酸多 态性位点rs29941与壮族儿童单纯性肥胖的相关性。方法对200名柳州某区小 学学龄前儿童(年龄均小于7岁)分别检测身高和体重，计算体重指数。利用 SNaPshot技术分析100例单纯性肥胖儿童和100例健康对照儿童的KCTD15基因 型及等位基因频率分布状况。结果肥胖组和健康对照组KCTD15基因T/T型、 T/C 型及 C/C 型基因型频率分别为 60.7%、34.6%、4.7%和 55.4%、39.6%、5.0%, 两组等位基因频率分别为78.0%、22.0%和75.2%、24.8%, C等位基因的OR值为 1.169, 95%的可信IX间为0.742-1.842。两组基因型与等位基因频率差异均无统 计学意义(Pgt；0.05)；肥胖组的体重指数水平明显高于对照组，差异有统计学 意义(Plt;0.05)。而肥胖组中各基因型间体重指数水平的差异没有统计学意义 (Pgt;0.05)。经Hardy-Weinberg遗传平衡定律检验，其等位基因在两种人群中 的分布符合遗传平衡，说明样木其有群体代表性。而该位点的等位基因及基因型 频率在所收集的肥胖组与对照组样木中分布未见显著异常。结论KCTD15基因 「S29941位点多态性与广丙壮族学龄前儿童单纯性肥胖无相关性。 关键词】含钾通道四聚化结构域15 基因多态性单纯性肥胖壮族 】R394 】A 】2095-1752 (2014) 02-0394-02 肥胖症是由遗传和各种环境因素相互作用下引起的，其特征性表现为脂肪细 胞数目增多和体积增［1］，通常都开始于生命的早期，以儿童时期快速增长的体 重指数(BMI)为标志［2］。流行病学研究发现，我国儿童单纯性肥胖率高达7.2%, 接近欧美发达国家水平，肥胖正逐渐成为严重影响我国居民身体素质的问题之一， 特别是儿童超重和肥胖现象愈发严重［3】。这种现象得不到充分的认识和改观， 将给我国今后的疾病预防与治疗工作带来极大困难。因此，在早期检测BMI水 平，防止过于肥胖，对于早期预防慢性代谢病，提高人民生活质量变得尤为重要。 到目前为止，对于肥胖的候选基因和易感基因位点的研究冇很多，其中于2009 年，研究人员通过对大量人群进行全基因组关联研究(GWAS)分析筛选出含钾 通道四聚化结构域15 (KCTD15)基因rs29941位点，被证实与肥胖相关［4】。本 文针对KCTD15基因rs29941位点多态性与广西柳州壮族学龄前儿童单纯性肥 胖进行分析，旨在采用SNaPshot技术［5］，一种基于单碱基延伸原理的SNP分型 新方法，从分子生物学角度探讨肥胖在广西壮族人群中的遗传机制。 1资料与方法 一般资料选取2011年9月-2013年5月来本院儿保科体检的壮族儿 童200人，儿童单纯性肥胖诊断标准：超过冋身高冋性别参照人群标准体质量的 20%者定为单纯性肥胖儿童［3］。肥胖组107例，平均身高1.16米，平均体重29.02kg; 健康对照组101例，平均身高1.01,平均体重15.26kg。两组均排除继发性肥胖 症且未服用激素与影响脂代谢的药物。两组间性别和年龄差异无统计学意义。 1.2方法 1.2.1血脂及血常规测定两组儿童于相冋条件下按照标准方法测量身高和体 重，根据公式BMI=W (kg)/H (m2)计算BMI，其中W代表体重，单位为千克， H代表身高，单位为米。抽取2mL静脉血予乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，于雅 培公司CELL-DYN3700全自动五分类血细胞分析仪上测定血常规。同时严格执行 室内质控程序。 1.2.2全血基因组DNA提取取200mu;LEDTA抗凝全血，用Quanqia试剂 盒提取全血基因组DNA, -2CTC保存。 1.2.3 KCTD15基因多态性的检测(1)引物的设计：应用PrimerPremier5软 件进行设计，由上海立菲生物技术有限公司合成。PCR扩增正向引物为F: TCATGCCTGGATGCACAAC,反向弓I物为 R: GATCTCACAACCAGCGAGTTC。SNaPshot 反应过程中延伸引物序列为 tttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttttTGACCTCTGCAGACCTAGGAo (2) PCR 扩 增反应：PCR 反应体系为 20mu;L,包括 10times;PCR 缓冲液（Mg2+free, invitrogen公司）2mu;L, dNTP 混合物 0.5mu;L （10