LYVE1在发育中大鼠肾内的表达研究　.docVIP

LYVE1在发育中大鼠肾内的表达研究 】目的探讨淋巴管内皮细胞透明质酸受体？1染 色阳性(LYVE21+)淋巴管在大鼠肾内的分布。方法胚胎期 第14、16、18、20天的胎鼠，和出生后第1、4、14、21 天及成年大鼠的肾脏切成厚50um的薄片，进行LYVE?1免 疫组织化学染色。结果LYVE?1+的淋巴管丛最早可在胚胎期 第16天的大鼠肾脏检测到。在胚胎期第18天，出生后第1、 4、7天和成年大鼠肾脏可见到LY VE?1+丛主要位于肾脏皮 质的动脉周围。LY VE?1+细胞在胚胎期第14天可检测到， 主要位于髓质，出生后阳性细胞数量显著增加，到出生后 第21天仅在外髓外带见到少量的LYVE71 +细胞。结论 LYVE? 1 +淋巴管主要位于肾脏的动脉周围，LYVE?1+细胞主 要位于肾脏髓质。 关键词】淋巴管内皮细胞透明质酸受体肾脏淋巴管 [Abs tract 】Objec tive Toinves tig atethedi st ributiono f intrarenal lymphaticve sselsindeve lopingratu s ingthelym ph aticmark erL YVE?The ratk idneys frome mbryo nicday 14 (E 14) toE2 0, f romneona te satpupday 1 (Pl)toP21a ndadultswer eLYVE?l+lym phaticvess e lsweredet ec tedandfo rme dlympha ticp lexusi nratk idney attheE 16st age. Fro mfe ta.lsta.ge El 8toAdult, L YVE?l+lymp haticvessel sweredistri butedalong a rteriesin co rtex. LYV E?1 +cellsa ppea redmai nlyin theme dullaa tE14 . Thenum ber softhece 11 sincrease d gradually, thenreduced . AtP21LYVE? 1+cellswer e onlyinLYV E?1+lympha tic vessels were distri buted along arteri esan dLYVE?l +ce llswerel oc atedinmed u11a. Key words］ LYVE? 1, kidney, 1 y mphaticve ss els 在人类和各种动物包括小鼠其肾内淋巴管的分布己有 研宄［1?3］，但是，对发育中肾脏内的淋巴管的来源和分 布目前知之不多。本实验应用淋巴管内皮细胞特异标记物 淋巴管内皮细胞透明质酸受体？1(1 ymphaticen d otheliums pe cifichya lur onanrec epto r?l，LY VE?1)研 究大鼠肾脏内淋巴管的表达。恶性肿瘤主要通过血道和淋 巴道形成远处转移，统计表明，50%以上的肿瘤经过淋巴道 转移，且发生较早，因此，本研宄也为肿瘤淋巴道转移机 制及抗肿瘤研宄提供实验基础。 1材料与方法 材料与来源应用Spr agueDa wley大鼠，试验动物的饲 养及试验操作符合韩国加图立大学动物保护协会的要求。 孕鼠由韩国加图立大学医学院动物中心提供。出生前大鼠 肾脏来自于胚胎期第14、16、18、2 0天的胎鼠，出生后肾 脏由生后第1、4、1 4、21天及成年的大鼠获得。每个年龄 段应用3?4只。 主要试剂兔抗小鼠多克隆抗体LYVE? 1购自Research Di agnostics I nc （稀释度1 : 10 00）;过氧化物酶连接的 驴抗兔 IgG 购自 Ja cksonlmmun o ResearchL ab oratorie s （稀释度1 : 100 ），明胶、皂苷和牛血清白蛋白均购自 Sig ma?Ald rich （美国）。 实验方法试验动物用％的乌拉坦（lml/kg）腹腔内注射 麻醉。妊娠1 4?16d的大鼠仰卧位固定于手术台上，剖腹 取胎鼠，分离胎鼠肾脏，P LP固定4° C过夜。利用振动切 片机（Pelc ol02, S eries 1000;Techni calP roducts Int ernation al，美国）将肾脏切成厚50 ym组织片，放入-70° C冰箱保存。 出生后14?21d及成年大鼠，PLP腹主动脉灌注固定。 分离肾脏，利用超薄切片机（Lei ca公司，德国）切成 1?2mm厚，PLP固定4° C过夜。 从-7 0° C冰箱中取出组织，新配制的50mMNH4 C1/