荧光分子传感器信号输出方式 - 显微镜门户-中国显微图像网.ppt

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荧光分子传感器信号输出方式 商贵芹 200425033 主要内容: 荧光分子传感器的组成 传感器设计 荧光信号输出方式: 比色荧光 荧光强度的变化 荧光光谱移动 比率荧光 荧光分子传感器的基本组成: 传感器设计: 如图: 荧光强度的变化: 荧光增强 (1)在原来峰位置增强 (2)出现新峰且荧光增强(ICT、FRET、EIPT等 ) (3)荧光回升(常见的stop PET、FRET) Org. Lett. 2005; 7(1); 87-90 荧光减弱或猝灭 (1)重原子效应 (2)PET (3)FRET Sci.Technol.12. (2001 R53. ) Org. Lett.; 2003; 5(12); 2083-2086 ICT引起的光谱移动: Donor Acceptor ICT引起的光谱移动: 小结: 单一依靠单波长荧光强度或光谱变化的分子传感器的缺点: (1)易受一些难以定量的可变性因素干扰 例如:光漂白、传感分子浓度、微环境(极性、 PH、温度、 仪器、操作人员等) (2)难以实现精确测定 比率荧光: 同时记录两峰位的波长下If值并计算If,入1/ If,入2的值从而获得比单波长传感更准确的数据. 比率荧光的优点 常见的几种比率荧光 比率荧光的优点: 克服了以上所述的缺点 能获得较精确的数据,甚至使精确定量成为可能 对外部环境及内部微环境可以进行内校正 更高的选择性和灵敏度 常见的几种比率荧光: 目标物种结合诱导的monomer -excimer ICT引起光谱移动的比率荧光 FRET引起光谱移动的比率荧光 两传感分子连用的比率荧光 PET引起的比率荧光 EIPT引起的比率荧光 其它… monomer -excimer 型 J. Am. Chem. Soc. 2003; 125(10); 2884-2885. 基于ICT型: 其它例子: 传感氟离子: FRET引起光谱移动的比率荧光: J. Am. Chem. Soc. 2002; 124(8); 1653-1657. 对时间的光谱响应图: FRET引起的比率荧光其它文献: Nature,1997,338,882-887 Science.1998,279,84-88 J.Am.Chem.Soc.2002,124,14286-14287 Chem.Eur.J.2003,9,N.7 1479-1495 两传感分子连用的比率荧光: J. Am . Chem. Soc.; 2005; 127(6); 1612-1613. ? The sensor system must meet the following criteria: Both 1 and 2 must show marked change in fluorescence upon complexation of Cd2+ ligands 1 and 2 must form 1:1 complexes with each of the metal ions the binding affinity of 1 toward Cd2+ and Cu2+ has to be at least 2 orders of magnitude superior to that of 2 in an analogous manner, 1 should bind Cu2+ better than Cd2+ for the system to achieve a reliable discrimination between “on” and “off” states 传感Cu2+的分子及谱图: 总结: 荧光分子传感器以其独特的优点吸引了众多分析科学家的注意,而且取得了显著的成绩。 但是,就目前的发展和研究来看,由于大部分分子传感器缺乏水溶性或者其激发波长局限在紫外区,因而失去了其在生物领域的应用,使其实用价值大大降低。这将成为以后我们努力的方向。 * * excimer or exc

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