《、叶绿体色素()》-课件.pptVIP

实验4 叶绿体色素的提取、分离、理化性质和叶绿素含量的测定 一、实验目的和要求：掌握植物中叶绿体色素的分离和性质鉴定、定量分析的原理和方法。 二、实验内容和原理：以青菜为材料，提取和分离叶绿体色素并进行理化性质测定和叶绿素含量分析。原理如下： 3、取代反应。 在酸性或加温条件下，叶绿素卟啉环中的Mg++可依次被H+和Cu++取代形成褐色的去镁叶绿素和绿色的铜代叶绿素。 H+取代Mg2+, Cu2+ (Zn2+)取代H+ 。 4、叶绿素受光激发，可发出红色荧光，反射光下可见红色荧光。 5、定量分析。叶绿素吸收红光和兰紫光，红光区可用于定量分析，其中645和663用于定量叶绿素a,b及总量，而652可直接用于总量分析。 三、主要仪器设备： 1、天平（万分之一）、可扫描分光光度计（）、离心机 2、研具、各种容（量）器、洒精灯等 四、操作方法与实验步骤： 1．定性分析： 鲜叶5g+95%30ml（逐步加入）,磨成匀浆 ? 2、叶绿素和类胡萝卜素的吸收光谱测定： 3．叶绿素定量分析： 鲜叶0.1g，加1.9mlH2O，磨成匀浆，各取0.2ml加80%丙酮4.8ml,摇匀，4000转离心3min,上清液在645，652，663测定OD，计算Chla,Chlb 和Chl总量的值。 五、实验数据记录和处理 Ca(mg/L