实验五食品还原糖的测定.docxVIP

实验八 食品(炼乳)中还原糖含量的测定  一、实验目的 1、了解食品中还原糖的含量； 2、学习直接滴定法测定还原糖的原理，并掌握其定糖方法。 3、通过对实验结果的分析，了解影响测定准确性的因素。 二、原理， 食品中的还原糖主要指具有还原性的葡萄糖、果糖、戊糖、乳糖、麦芽糖等，还原糖之所以具有还原性，是由于其分子中含有游离醛基(-CHO)或酮基(C=O)。 测定还原糖的经典化学方法都是以其能被多种试剂氧化为基础的。在这些方法中，以各种根据碱性酒石酸铜溶液氧化作用改进方法的应用最广。本实验就是采用使用碱性酒石酸铜作为氧化剂的直接滴定法。 碱性酒石酸铜溶液A、B二液等体积混合时生成的天蓝色Cu(OH)2沉淀后，立即与酒石酸钾钠起反应生成深蓝色的酒石酸钾钠铜络合物。此络合物与还原糖共热时，二价铜即被还原糖还原为一价的红色氧化亚铜沉淀，氧化亚铜沉淀与亚铁氰化钾反应，生成可溶性化合物，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原成无色，溶液呈淡黄色而指示滴定终点，根据还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，以及测定样品液所消耗的体积，计算还原糖含量。反应式如下： CuSO4＋2NaOH→Cu(OH)2↓＋Na2SO4 COOK COOK │ │ CHOH CHO │ ＋Cu(OH)2→│ Cu＋2H2O CHOH CHO │ │ COONa COONa COOK COOK │ CHO COOH │ CHO │ │ CHOH │ Cu＋(CHOH)4 →(CHOH)4 ＋│ ＋Cu2O↓ CHO │ │ CHOH │ CH2OH CH2OH │ COONa COONa 三、仪器与试剂 1、仪器 (1)容量瓶 100 ml、250 ml (2)三角瓶 250 ml (3)碱式滴定管 50 ml或25 ml (4)烧杯 100m1 (5)吸管 5 ml、50 ml (6)分析天平 (7)电炉 1KW可调 (8)恒温水浴锅 2、试剂 (1) 碱性酒石酸铜溶液A液：称取15.00 g硫酸铜(CuSO4·5H2O)(AR)及0.05g次甲基蓝，溶于蒸馏水中并稀释至1000 ml。 (2) 碱性酒石酸铜溶液B液：称取50g酒石酸绅钠(AR)和75g NaOH (AR)，溶于蒸馏水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后用蒸馏水稀释至1000 ml，贮存于具橡胶塞玻璃瓶中。 (3)乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3ml冰醋酸，加水溶解并稀释至100ml。 (4)亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100ml。 (5)葡萄糖标准溶液：准确称取1.0000g至 (96±2)℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加人5ml盐酸，并以水稀释至1000ml。此溶液葡萄糖浓度为l.0 mg/ml。 3、样品 炼乳 四、实验步骤 1、样品制备 称取炼乳样品约2.50 ~ 5.00g于100ml烧杯中，加入50ml水溶解，转移到25Oml容量瓶中，并用少量水洗涤烧杯，洗液并人容量瓶中。慢慢加入5ml乙酸锌溶液和5ml亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀。沉淀，静止30min，用干燥小滤纸做成小菊花形干过滤，弃去初始滤液25ml，其余滤液备用。 2、碱性酒石酸铜溶液的标定 于25Oml三角瓶中吸取碱性酒石酸铜A液及B液各5.0ml，加1Oml水和玻璃珠3粒，从滴定管滴加约9ml葡萄糖(或其他还原糖)标准溶液并摇匀，置于电炉上加热至沸腾 (要求控制在2min内沸腾)，然而趁热以每2s滴加1滴的速度继续滴加葡萄糖 (或其他还原糖)标准溶液，直至溶液蓝色刚好退去，显示淡黄色即为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。 同时平行操作三份，沸腾后滴人的葡萄糖(或其他还原糖)标准溶液的体积应控制在0.5～1.0ml以内，滴定时间应控制在1min内。否则，应增加预加量并重新滴定。 按下式计算10ml碱性酒石酸铜溶液(A液、B液各5.0ml)相当于标准葡萄糖的质量(mg) 式中： F一10 ml碱性酒石酸铜溶液(A液、B液各5.0ml)相当于标准葡萄糖的质量，mg V—标定时消耗标准葡萄糖溶液的体积，ml C一标准葡萄糖溶液的质量浓度