吸附法思考!直接使用酶固定化酶与固定化细胞各有什么优缺点.PPT

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吸附法思考!直接使用酶固定化酶与固定化细胞各有什么优缺点

课题3 酵母细胞的固定化 * * 阅读P49,并思考: 1、解决酶应用中存在问题的方法是? 2、这种方法的优点是什么? 3、什么是高果糖浆?使用它有何好处? 4、生产高果糖浆需要什么酶?其作用是 什么?这种酶有何特点? 5、了解高果糖浆生产过程。 (一) 固定化酶的应用实例 在生产实际中使用固定化酶技术有无不足?如有不足,怎么办? 有 一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行,所以操作比较麻烦。 可采用固定化细胞技术。 将酶或细胞固定化的方法 将酶(或细胞)包埋在细微网格里 包埋法 将酶(或细胞)相互连接起来 化学结合法 将酶(或细胞)吸附在载体表面上 吸附法 (二)固定化细胞技术 课堂讨论: 1.从操作角度来考虑,你认为固定化酶技术与固定化细胞技术哪一种方法更容易? 2. 哪一种方法对酶活性的影响更小? 3.固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶? 4.如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应,应该选择哪种方法? 5.如果反应底物是大分子物质,又应该采用哪种方法? 固定化细胞技术 固定化细胞固定的是一系列酶 固定化细胞技术 固定化酶技术 固定化细胞技术 1、 对固定酶的作用影响较小的固定方法是什么? 2、 将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的发酵过程变为连续的酶反应,应当固定(酶、细胞);若将蛋白质变成氨基酸,应当固定(酶、细胞)。 吸附法。 直接使用酶、固定化酶与固定化细胞各有什么优缺点? 固定后的酶或细胞与反应物不容易接近,可能导致反应效果下降等。 成本低,操作更容易。 固定化细胞 一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。 酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用。 固定化酶 对环境条件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量。 催化效率高,低耗能、低污染等。 直接使用酶 不足 优点 类型 1、酵母细胞的活化 思考: 关于酵母菌你知道哪些知识? 什么是活化? 怎样活化? 应注意什么? 三、实验操作 (一)制备固定化酵母细胞 2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液 3、配制海藻酸钠溶液 应当注意什么问题? 1、加热时要用小火,或者间断加热 2、海藻酸钠的浓度 浓度过高——将很难形成凝胶珠; 浓度过低——形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少, 影响实验效果。 4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 为什么海藻酸钠溶液要冷却至室温? 5、固定化酵母细胞 以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中,观察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠的情形。将这些凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30 min左右。 这一阶段成功与否呢?怎样评价? 观察凝胶珠的颜色和形状: 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少; 如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,需要再作尝试。

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