双基因转殖复制猪.PPT

體細胞核轉置法 早期複製同源家畜個體的研究，偏重於以胚葉細胞當供核者的核轉置技術，然而欲獲得為數眾多的同源個體仍有其限制。近年來，為加速畜群的遺傳改進及提高家畜生產效益，胚的無性增殖及基因轉殖技術漸受重視。 一 九 九七年，威瑪特（ Ian Wilmut）將成年綿羊的腺上皮細胞，以逐漸降低培養液中血清含量的方式，將供核細胞之細胞周期回歸至G0期後，成功獲得核轉置羔綿羊——桃麗。因此，已分化的細胞核，亦可經由卵母細胞的孕育而調控至分化前的狀態，此創舉突破了家畜體細胞核轉置及基因剔除技術的研究瓶頸。 體細胞核轉置技術 體細胞核轉置技術，一般除應用於複製人類所需的特殊種源動物外，在畜產上也可用以複製相同遺傳背景的高產性能家畜。若進一步配合分子生物學及遺傳工程技術，將可取代原核顯微注射技術及胚幹細胞法，生產基因轉殖動物。 一九九七年許尼克（Angelika Schnieke）等人首先在體細胞核轉置技術結合分子生物學及遺傳工程技術方面有了突破性的發展。 他先在體外進行綿羊胎兒纖維母細胞的初代培養，再將綿羊β乳球蛋白啟動子與人類第九凝血因子和抗新黴素基因構築成的融合基因，轉染送入胎兒成纖維母細胞中，同時在體外培養期間以胎兒成纖維母細胞中。 基因轉殖羊 同時在體外培養期間以新黴素篩選，挑選出帶有外源基因的細胞作為供核細胞，配合血清飢餓法調控，進行核轉置動物的產製。 結果在五頭出生存活的仔綿羊中，經DNA分析證實五隻皆帶有該外源基因，基因轉殖的效率達到100％；相較於以原核顯微注射法產製基因轉殖羊的效率（4.35％）高出了許多。使用未經血清飢餓法調控細胞周期的胎牛成纖維母細胞當作供核細胞，配合細胞轉染技術，也成功地產下基因轉殖犢牛和山羊。 以供核體細胞株為載體進行家畜的基因轉殖，若先在體外進行基因轉殖後的細胞篩選，則能有效提升產製效率，未來將可利用此法進行基因定位及剔除的工作，有助於做最適當的基因調控。 雙基因轉殖複製豬 91年4月15日 在台灣動物科技研究，研究多時的複製豬誕生了，取名為「酷比」。單單只是成功地複製豬隻已經很有成就了，因為現在世界上能複製出哺乳類動物的國家團隊沒有幾個，我國的台灣動物科技研究所就是其中之一。吳信志表示，真正讓各界刮目相看的是，酷比豬是雙基因轉殖複製豬，牠創下兩項世界第一，牠是世界首例以高齡母豬耳皮膚細胞作為供核者的複製豬，同時也是全球第一例雙基因轉殖複製豬。 .tw/~lseduip/U-BET/ubet/F4/group1/achi.htm 豬乳鐵蛋白基因 + 人類 第9凝血因子基因 基因轉殖羊 91年10月9日 行政院農委會畜產試驗所利用羊的耳細胞為供核源，成功複製出兩隻台灣首例、也是世界首例的阿爾拜因乳羊，分別取名為「寶吉」、「寶祥」。 世界上利用體細胞複製乳用山羊之成功案例不多，其中取自成年乳羊卵巢濾泡腔內粒性細胞，成功率為1.3％，僅存活一頭；而應用胎兒之體細胞迄今仍存 活者有六頭，因此以阿爾拜因 成羊的耳細胞為供核源來分 娩複製小羊者，台灣為世界 首例。 .tw/~lseduip/U-BET/ubet/F4/group1/achi.htm 經由基因轉殖豬作為異種器官移植用之研究在試驗中用以轉殖之基因包括二類，一為human decay accelerating factors (hDAF)，另一為human leucocyte antigen class II (HLA- II)基因；hDAF可以抑制補體之活化反應，以解決超急性排斥反應，HLA- II則為減緩T細胞之活化反應者，轉殖之動物係以豬為對象；目前本試驗已成功獲得帶有HLA-DR，HLA-DQ，HLA-DP及hDAF等四種基因轉殖豬，正進行混合淋巴球反應及人血灌流等前臨床測試，俾確認未來提供進行異種器官移植之可行性。 .tw/~lseduip/U-BET/ubet/F4/group1/achi.htm 近年來，國內外分子生物學、基因工程及基因轉殖技術的研發，均已達純熟的階段，台灣亦已建立完整之技術平台，可供基因轉殖動物的研究。惟目前被選殖及構築的基因，其調控機制與功能性的了解仍占人類整體基因中的少數。其中具有經濟價值，並可於家畜獲得適當表現，如提高家畜生產性能及抗病力者為數尚少。 所幸，近年來動物、植物、甚至人類等的基因組譜定序工作，均在全球各地陸續展開，並持續解密中。相信在人類及其它