《米曲霉转化盾叶薯蓣中的甾体皂苷生成薯蓣皂苷元的工艺优化》-毕业论文.docVIP

米曲霉转化盾叶薯蓣中的甾体皂苷 生成薯蓣皂苷元的工艺优化 摘要：目的 优化米曲霉直接转化盾叶薯蓣药材生成薯蓣皂苷元的工艺条件。 方法 从培养基缓冲盐、药材载量、微生物接种量、温度等几个方面对转化过程进行了优化。 结果 选用pH5.0或6.0的1/15 mol/L的Na2HPO4-KH2PO4缓冲液，药材载量为3.33%，米曲霉接种量8%，37℃培养84h后提温至50℃再继续转化8h，能够达到最大的转化率。薯蓣皂苷元的最大得率为17.06mg/g药材。 结论 米曲霉能够将盾叶薯蓣中的甾体皂苷转化为薯蓣皂苷元，且转化后总的甾体皂苷有大量释放，可达到转化前的1.73倍。 关键词：米曲霉；盾叶薯蓣；甾体皂苷；薯蓣皂苷元 Biotransformation of steroidal saponins in Dioscorea Zingiberensis C.H. Wright to diosgenin by Aspergillus oryzae QI Shan-shan, DONG Yue-sheng, LIU Lin, XIU Zhi-long (Department of Bioscience and Biotechnology, School of Environmental and Biological Science and Technology, Dalian University of Technology, Dalian 116024, China) ABSTRACT: OBJECTIVE To optimize the process of biotransformation of steroidal saponins in Dioscorea Zingiberensis C.H. Wright to obtain diosgenin. METHODS Experiments were carried out to investigate the factors including pH of buffer solution, treatment capacity, biomass inoculation, and culture temperature. RESULTS 1/15 mol/L Na2HPO4-KH2PO4 buffer with pH5.0 or 6.0, 3.33% raw herb in culture medium, 8% biomass inoculation, culturing at 37℃ for 84h, then 50℃ for 8h could obtain the highest diosgenin yield of 17.06mg/(g raw herb). CONCLUSION Aspergillus oryzae could transform steroidal saponins in D. Zingiberensis to diosgenin and raise total content of saponins and sapogenin 1.73 times to the original content pre-transformation. KEY WORDS: Aspergillus oryzae; Dioscorea Zingiberensis C.H. Wright; steroidal saponins; diosgenin 薯蓣皂苷元是合成甾体激素和甾体避孕药的一种重要原料[1]，其本身也具有抗肿瘤等生理功能[2-3]。它的传统生产方法是化学法，即直接酸水解的方法。但由于该方法收率不高、腐蚀设备且所排出的废水污染较为严重[4]，近年来研究人员对其进行了一系列的技术改造，如预发酵[5]、淀粉-纤维素分离[6]、酶解发酵[7]、阶梯生物催化协同提取[8]、糖化-膜回收[4]等方法。改进后的方法能够提高产品收率，减少污染，但仍以酸水解作为中心技术，没有从根本上改变这种方法。 微生物转化法是改造、修饰化合物结构的一种重要的方法，近年来在天然产物及药物生产等领域有重要的作用。我们对这种条件温和且环境友好的方法进行了初步的尝试，且实验中直接对药材进行的转化，不需要添加额外的碳源氮源，方法简便易行。本实验的前期工作确定了药材及转化产物中的甾体皂苷及苷元的结构（其结构如图1所示），并对它们进行了定量分析。本文在此基础上对该转化过程进行优化，从影响微生物培养与酶的生成、作用的几个重要方面提高转化率。 图1盾叶薯蓣药材及其米曲霉转化产物中的甾体皂苷及苷元的结构 Fig 1 Chemical structures of steroidal saponins an