化妆品中吡硫翁锌等5种去屑剂的检测方法.DOC

附件1： 化妆品中吡硫翁锌等5种去屑剂的检测方法 （征求意见稿） 1 范围 本方法规定了测定发用类化妆品中水杨酸、吡硫翁锌、酮康唑、氯咪巴唑和吡罗克酮乙醇胺盐5种去屑剂的高效液相色谱法。 本方法适用于发用类化妆品中水杨酸、吡硫翁锌、酮康唑、氯咪巴唑和吡罗克酮乙醇胺盐5种去屑剂的含量测定。 2 方法提要 水杨酸、吡硫翁锌、酮康唑、氯咪巴唑和吡罗克酮乙醇胺盐5种去屑剂在230nm处有紫外吸收，以乙腈＋甲醇＝95＋5提取化妆品中水杨酸等5种去屑剂，用高效液相色谱分离，并根据保留时间和紫外光谱图定性，峰面积定量。本方法中各种去屑剂的检出限、定量下限及取0.5g样品时的检出浓度和最低定量浓度见表1。 表1 各种去屑剂的检出限、定量下限、检出浓度和最低定量浓度 物质名称 水杨酸 吡硫翁锌 酮康唑 氯咪巴唑 吡罗克酮乙醇胺盐 检出限 （ng） 3 12 4 3 5 定量下限 （ng） 10 40 15 10 20 检出浓度 （% ） 0.006 0.02 0.008 0.006 0.01 最低定量浓度 （%） 0.02 0.08 0.03 0.02 0.04 注：以上数据是使用二极管阵列检测器，检测波长为230nm时获取的 3 试剂 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为一级实验用水。 3.1 甲醇，色谱纯。 3.2 乙腈，色谱纯。 3.3 磷酸，相对密度=1.685，w（H3PO4）=85%，优级纯。 3.4 磷酸二氢钾。 3.5 乙二胺四乙酸二钠。 3.6 去屑剂标准溶液：称取适量去屑剂标准品（精确至0.0001g） 表2 各去屑剂的储备溶液浓度及标准系列浓度 物质名称 水杨酸 吡硫翁锌 酮康唑 氯咪巴唑 吡罗克酮乙醇胺盐 储备溶液浓度 /（mg/L） 400 200 400 400 500 标准系列浓度 /（mg/L） 40 20 40 40 50 80 40 80 80 100 160 80 160 160 200 320 160 320 320 400 400 200 400 400 500 4 仪器和设备 4.1 高效液相色谱仪，具有二极管阵列检测器，配色谱工作站。 4.2 微量进样器或自动进样装置。 4.3 pH计。 4.4 超声波清洗器。 4.5 离心机。 4.6 分析天平，感量0.0001g。 4.7 分析天平，感量0.001g。 5 分析步骤 5.1 样品预处理 称取样品约0.5g（精确至0.001g）于50mL具塞比色管中，加入乙腈＋甲醇＝95＋5的混合溶液至刻度，振摇，超声提取30min，浑浊溶液可取适量5000rpm离心5min。经0.45 5.2 测定 5.2.1 色谱参考条件 色谱柱：C18 柱，150mm×4.6mm，5? 流动相：乙腈+甲醇+10mmol/L磷酸二氢钾水溶液 [添加乙二胺四乙酸二钠至c（Na2EDTA）=0.5mmol/L，用磷酸调节水溶液的pH至4.0 ]＝50+10+40； 流速：1.0mL/min； 检测器：二极管阵列检测器，通用检测波长为230nm；水杨酸和吡罗克酮乙醇胺盐的测定可采用300nm；吡硫翁锌的测定可采用340nm。 柱温：室温。 5.2.2 校准曲线的制备 在设定色谱条件下，分别取去屑剂标准系列（3.6）5? 5.2.3 样品测定 在设定色谱条件下，进5? 6 平行实验 按以上步骤，做两份样品的平行测定。在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两次测定值的算术平均值的10%。 7 计算 D ? ? ? V w（去屑剂）= —————— ×10-4 m 式中：w（去屑剂）——化妆品中去屑剂的质量分数，%； ? ——从校准曲线上查得的待测样液中去屑剂的质量浓度，mg/L； V ——样品定容体积，mL； m ——样品用量，g； D —— 稀释倍数（不稀释则取1）。 8 回收率和精密度 经多家实验室验证，5种去屑剂的加标回收率在88.5% ~ 109.4%之间，相对标准偏差在0.2% ~ 3.8%之间。 9 干扰排除 对于有干扰的样品，测定水杨酸和吡罗克酮乙醇胺盐时建议检测波长调整为300nm，测定吡硫翁锌时检测波长调整为340nm。 10 色谱图 230nm 230nm 1 2 3 4 5 300nm 300nm 1 2 3 4 5 340nm 340nm 1 2 3 5 4 图1 不同检测波长下去屑剂标准色谱图 1：水杨酸；2：吡硫翁锌；3：酮康唑；4：氯咪巴唑；5：吡罗克酮乙醇胺盐 化妆品中吡硫翁锌等5种去屑剂的检测方法起草说明 为进