黄河裸裂尻鱼肥胖基因克隆及其对青藏高原季节性冷环境的适.docVIP

黄河裸裂尻鱼肥胖基因克隆及其对青藏高原季节性冷环境的适应性表达 赵兰英1，晁 燕1，李长忠2，谢保胜2，申志新3，王国杰3，王振刚3，李 超1，拜彬强1，祁得林1? ?[基金项目] 国家自然科学基金项目31160226）；教育部新世纪优秀人才支持计划（NCET-09-0861）。 [作者简介] 赵兰英（1987—），女，在读硕士研究生；研究方向：动物分子遗传 [通讯作者] 祁得林（1973—），男，教授，博士，硕士生导师。研究方向：动物分子遗传与生态学。Email: HYPERLINK mailto:delinqi@126.com delinqi@126.com。 （1.青海大学农牧学院动物科学系，西宁810016；2.青海大学生物科学系，西宁 810016；3.青海省渔业环境监测站，青海省高原水生生物及生态环境重点实验室，西宁 810012） 【摘要】 目的 克隆黄河裸裂尻鱼肥胖基因（obese gene, ob），分析编码蛋白leptin的序列特征，检测ob mRNA的组织特异性表达和不同环境温度下肝胰脏和白肌ob mRNA的相对表达水平，为探究黄河裸裂尻鱼在青藏高原季节性寒冷环境下的生态适应机制提供科学数据。方法 利用RT-PCT、5′-RACE和3-RACE法获得ob基因全长cDNA序列。通过已知cDNA序列设计半定量RT-PCR和Real-time PCR引物，进行表达研究。结果 黄河裸裂尻鱼ob基因序列全长为1337bp，其中开放阅读框（ORF）长513bp，编码170个氨基酸。黄河裸裂尻鱼ob mRNA在心脏、肾脏、脂肪、肠、精巢、肝胰脏、鳃、脑和肌肉9个被检组织中均有表达，其中在心脏中表达最强，肌肉组织中表达最弱。栖息水域环境温度下降，将显著抑制黄河裸裂尻鱼肝胰脏和白肌ob mRNA的表达。结论 黄河裸裂尻鱼ob基因特殊的组织表达特征可能与其特定组织的能量代谢及其特殊的生物学功能有关。Leptin在黄河裸裂尻鱼能量代谢调节和季节性环境适应方面发挥着重要作用。 【关键词】黄河裸裂尻鱼；肥胖基因；克隆；表达；适应 Molecular cloning of ob gene in Schizopygopsis pylzovi and its mRNA expression responding to seasonal cold environment of the Qinghai-Tibetan Plateau ZHAO Lan-ying1, CHAO Yan1, LI Chang-zhong2, XIE Bao-sheng2, SHEN Zhi-xin3, WANG Guo-jie3, WANG Zhen-gang3, LI Chao1, BAI Bin-qiang1, QI De-lin1 (1. Animal Science Department of Agriculture and Animal Husbandry College, Qinghai University, Xining 810016, China; 2. Department?of?Biological?Sciences, Qinghai?University, Xining?810016, China; 3. Key Lab for Plateau Hydrobiology and Ecological Environment of Qinghai Province, Fishery Environmental Monitoring Station of Qinghai Province, Xining 810012, China) 【Abstract】Objective In order to provide scientific data for the adaptive mechanism of Schizopygopsis pylzovi to seasonal cold environment of the Qinghai-Tibetan Plateau, the obese gene (ob) of Schizopygopsis pylzovi was cloned and its encoding protein leptin was analyzed. Then the expression pattern of the ob mRNA in tissues and the relative expression level of the ob mRNA in hepatopancreas and white muscle of Schizopygopsis pylzovi from habitats