实用HPLC方法的建立教学幻灯片.pptVIP

实用HPLC方法的建立;5 色谱分析中各种图谱现象的判断 5.1 基线噪音的产生和处理 5.2 基线漂移(上漂和下漂) 5.3 倒峰的产生和消除 5.4 鬼峰的产生和消除 5.5 峰前移和退后的判断 5.6 前沿峰和拖尾峰的判断 5.7色谱双峰的判断 5.8 色谱峰变胖的判断和处理;1 前言;2 HPLC方法建立的步骤;;2.1 了解样品的有关情况;1 分析大分子、小分子还是生物分子 一般常规的HPLC分析分子量2000以下，大分子一般采用凝胶色谱、生物大分子采用不能变性的色谱体系。 2 样品是混合物、天然物质还是基本是单一物质。 如果是天然物质，一般分离完全采用梯度体系。混合物中是否有结构类似的异构体，组分复杂的还是采用梯度，是否是系列反应的产物。 3 测定是主成分、还是少量成分或痕量成分。 主含量的测定一般比较容易；但少量要考虑分离完全的问题；痕量成分则要考虑检测器的类型，采用何种提取方法和检测的灵敏度等。 ;4 分离化合物是极性，弱极性、非极性还是离子化合物、两性化合物。 非极性化合物以正相体系较多，如果溶于反相体系的溶剂，可采用反相体系。 弱极性、极性化合物采用反相较为方便，可在流动相中添加改性剂，调节合适的pH。 离子化合物可以采用反相，调节pH；或者添加离子对试剂；也可采用离子交换。 两性化合物中水溶性差的可采用反相；但在反相出峰快的则考虑离子交换；也可考虑衍生后测