实验五、氨基酸的分离鉴定--滤纸层析法优秀教案.pptVIP

2006-5-29 浙江万里学院生物与环境学院实验中心 实验一、氨基酸的分离鉴定 ——纸层析法 一、实验目的 通过氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作技术。 二、实验原理 纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。利用不同物质在两种互不相溶的溶剂中的分配系数不同而得到分离。 展层剂由有机溶剂与水组成。在纸上，水被吸附在纤维素的纤维之间形成固定相，当有机相沿纸流动经过层析斑点时，层析点上的溶质就在有机相和水相之间进行分配。当有机相不断流动时，溶质就沿着有机相流动方向移动，不断进行分配，溶质中各组分的分配系数不同，移动速率不同，因而彼此分开。 各组分由于移动速度不同，物质被分离后在层析纸上的位置也不同，可用Rf 值来表示： 原点到层析点中心距离 Rf ＝ ——————————— 原点到溶剂前沿的距离 在一定的条件下某物质的Rf值是常数，可作为定性分析的依据。 Rf 值大小与样品物质的结构性质、溶剂系统、层析滤纸的质量及展层方式、温度、样品溶液中的 杂质等因素有关。 物质结构与性质 物质的极性大小决定了物质在水和有机相之间的分配情况，其极性的大小主要取