第三讲高效液相色谱原理及构造.pptxVIP

第三讲 高效液相色谱(HPLC)的原理与构造;内容概要;一、 什么是HPLC？;高效液相色谱的流程;二、高效液相色谱固定相和流动相; （3）化学键合固定相;化学键合固定相的特点：; 2.液-固吸附分离固定相;3.离子交换色谱分离固定相; 4. 空间排阻分离固定相;2.2 液相色谱的流动相;2. 流动相类别;3. 流动相选择;4. 选择流动相时应注意的几个问题;2.3 HPLC分类;2.4 HPLC的基本类型：;梯度： —在运行过程中溶剂组成变化； —渐变或台阶式变化。 100% H20/ 0% MeOH 到0% H2O/100% MeOH;三、HPLC分离公式与术语;基线(base line)——经流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。 噪音(noise)——基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。; 漂移(drift)——基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起，柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。 色谱峰(peak)——组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线（高斯Gauss曲线）。不对称色谱峰有两种：前延峰(leading