单个核细胞与骨肉瘤细胞之间相互作用的研究-外科学(骨科)专业论文.docx

目录 HYPERLINK \l _bookmark0 英文缩略语表 1 HYPERLINK \l _bookmark1 中文摘要 2 英文摘要 4 HYPERLINK \l _bookmark2 前言 6 HYPERLINK \l _bookmark3 材料和方法 8 结果 15 HYPERLINK \l _bookmark4 讨论 25 HYPERLINK \l _bookmark5 结论 31 HYPERLINK \l _bookmark6 参考文献 31 HYPERLINK \l _bookmark64 综述 35 HYPERLINK \l _bookmark54 致谢 45 福建医科大学硕士学位论文 福建医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 1 英文缩略语表 缩略语 英文全称 中文全称 DMEM Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium  达尔伯克(氏)改良伊格 尔(氏)培养基 DMSO Dimathyl Sulfoxide 二甲基亚砜 FBS Fetal Bovine Serum 胎牛血清 PBS Phosphate Buffer Saline 磷酸盐缓冲溶液 TGF-β transforming growth factor-beta 转化生长因子-β IL-6 Interleukin-6 白细胞介素 6 IL-10 Interleukin-10 白细胞介素-10 单个核细胞与骨肉瘤细胞之间相互作用的研究 中文摘要 [目的] 体外建立骨肉瘤HOS细胞与脐血单个核细胞共培养模型，观察共培养微环境中炎症因子 TGF-β、IL-6、IL-10的浓度变化对骨肉瘤HOS细胞生物学性状的影响。 [方法] 1. 提取脐血单个核细胞，与骨肉瘤HOS细胞共培养3、5、7d，共培养组为实验组，两种 细胞单纯培养设为对照组。 2. 应用ELISA技术检测各组上清液中细胞因子TGF-β、IL-6、IL-10的含量变化。 3. 应用transwell小室培养法、MTT法检测各组骨肉瘤HOS细胞侵袭、迁移及增殖能力等 生物学性状的变化。 4. 应用SPSS13.0 软件统计分析，计量资料用均数±标准差(Mean±SD)描述,数据进行正 态性检验，两组间比较采用独立样本 t 检验；多组间比较采用单因素方差分析，以 P0.05 表示差异有统计学意义。 [结果] 1. 在共培养的第 1d，肿瘤细胞周围有大量的单个核细胞聚集，肿瘤细胞状态欠佳；随 着共培养时间的延长，相比对照组，共培养组单个核细胞逐渐减少，而肿瘤细胞生长旺 盛。 2. 骨肉瘤 HOS 细胞能够自身分泌较高浓度的细胞因子 TGF-β，而脐血单个核细胞分 泌的 TGF-β的量甚少；两种细胞共培养后 3d，共培养组的 TGF-β浓度明显高于 HOS 组（p0.05）；共培养 5d，两组相差无统计学意义；共培养 7d，共培养组的 TGF-β 浓度明显低于 HOS 组（p0.05）。另外，正常情况下单个核细胞分泌极微量 TGF-β。 3. 共培养组 IL-6、IL-10 的浓度明显高于同一观察点的对照组（p0.05），也高于同一 时间点的单个核细胞培养组，其中共培养第 3 天，共培养组与单个核细胞对照组差别有 显著性意义（p0.01）。共培养 7 天，微环境中 IL-6 浓度均大于对照组。另外，骨肉瘤 细胞对照组分泌极少量 IL-10。 4.共培养第 3d，共培养组骨肉瘤 HOS 细胞的迁移、侵袭数量减少，增殖能力明显受抑制； 共培养第 5d，培养组与对照组骨肉瘤 HOS 细胞的迁移、侵袭及增殖能力差异无明显统计 学意义；随着共培养时间的延长，在第 7d 时，共培养组骨肉瘤 HOS 细胞的迁移、侵袭 数量明显增多，增殖能力明显增强，具有明显统计学差异（p0.05）。 [结论] 1、骨肉瘤细胞与脐血单个核细胞共培养微环境可促进骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭； 2、TGF-β 与 IL-6 可能是参与骨肉瘤细胞生物学改变的重要因素； 3、微环境通过促进 IL-6 、IL-10 等细胞因子的分泌，介导炎症反应和免疫抑制。 [关键词] 骨肉瘤，单个核细胞，HOS细胞，TGF-β，IL-10，IL-6 To study the interaction between mononuclear cells and osteosarcoma cells Abstract Objective: To explore the change of the cell morphology of human osteosarcoma HOS cells and mononu