敲低TRAF6对白血病K562细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制.PDF

中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2015, 37(12): 1659–1665 DOI: 10.11844/cjcb.2015.12.0247 敲低TRAF6对白血病K562细胞增殖和凋亡的 影响及其分子机制 * 张帅帅 鲜敬荣 邹 琴 全 静 金红君 高 叶 晟 张 伶 (重庆医科大学检验医学院, 临床检验诊断学教育部重点实验室, 重庆市重点实验室, 重庆 400016) 报 摘要 该文探讨了干扰肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6, TRAF6)表达对人白血病K562 细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制。将靶向TRAF6基因 的shRNA慢病毒载体感染K562 细胞, 利用荧光显微镜观察感染效率; Western blot方法检测TRAF6 蛋白表达的改变; CCK-8法检测体外细胞增殖活性; 流式细胞术分析细胞凋亡率; Western blot方 学 法检测凋亡相关蛋白Bax 、Bcl-2表达和AKT磷酸化水平的变化。结果显示, TRAF6-shRNA慢病 毒载体成功感染K562 细胞, TRAF6蛋白表达水平明显下降。与空白对照组和TRAF6-NC组相比 较, TRAF6-shRNA组细胞增殖能力明显受抑(P0.05), 而细胞凋亡率增加(P0.05); 同时, 促凋亡蛋 白Bax表达升高、抗凋亡蛋白Bcl-2表达下降。此外, 干扰TRAF6可下调K562 细胞p-AKT(T308)和 学 p-AKT(S473)活性, 而总AKT水平未见明显变化。该研究表明, 干扰TRAF6表达可抑制K562细胞增 殖和诱导细胞凋亡, 其机制可能与下调AKT活性有关, 提示TRAF6可作为白血病治疗的一个潜在靶 点。 关键词 TRAF6; 白血病; RNA干扰; 增殖; 凋亡; AKT 物 The Effect of TRAF6 Knockdown on Proliferation and Apoptosis of K562 Leukemia Cells and Its Molecular Mechanism 生 Zhang Shuaishuai, Xian Jingrong, Zou Qin, Quan Jing, Jin Hongjun, Gao Peng, Ye Sheng, Zhang Ling* (College of Laboratory Medicine, Key Laboratory of Laboratory Medical Diagnostics Designated by the Ministry of Education, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China) 胞 Abstract This work was aim to investigate the effect of TRAF6 knockdown on proliferation and apoptosis of human K562 leukemic cell line and its molecular mechanism. In this study, the shRNA ta