沉默Semaphorin4D基因对肺癌A549细胞的影响及作用机制的分析-肿瘤学专业论文.docxVIP

目 录 英文缩略词表 1 ABSTRACT 3 前 言 5 材料与方法 7 实验结果 21 讨 论 30 结 论 33 参考文献 34 综 述 37 致 谢 49 英文缩略词表 英文缩写 英文全称 中文全称 Sema4D Semaphorin4D 轴突导向因子 4D PI3K Phosphatidylinositol-3-kinase 磷脂酰肌-3-激酶 siRNA Short interfering RNA 小干扰 RNA RNAi RNA interference RNA 干扰 DMSO Dimethyl sulphoxide 二甲基亚砜 PBS Phosphate buffered solution 磷酸盐缓冲溶液 MTT Methylthiazoltetrazolium 噻唑兰 OD Optical Density 吸光度 IR Inhibition rate 抑制率 mRNA Messenger RNA 信使 RNA AKT Serine/Threonine protein kinase 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 RT-PCR Real time polymerase chain reaction 实时荧光定量聚合酶链反应 rpm Revolutions per minute 每分钟转数 TBS Tris buffered saline Tris 缓冲溶液 RPMI1640 Roswell Park Memorial Insitute RPMI1640 培养基 BSA Bovine serum albumin 牛血清白蛋白 SDS Sodium dodecyl sulphate 十二烷基硫酸钠 Western blot Western blot 蛋白质印迹 DEPC Diethyl pyrocarbonate 焦碳酸二乙酸 dsRNA Double-stranded RNA 同源双链 RNA Bp Base pairs 碱基对 ul Microlitre 微升 min Minute 分钟 KD Kilodalton 千道尔顿 沉默 Semaphorin4D 基因对肺癌 A549 细胞的 影响及作用机制的研究 硕士研究生：李瑞超 导 师：伍 钢 教授 华中科技大学同济医学院附属协和医院肿瘤中心，武汉，430023 中文摘要 目的：利用基因沉默和转染技术，在肺癌 A549 细胞株中建立 Semaphorin4D 基 因沉默体系，并探讨沉默 Semaphorin4D 基因对肺癌 A549 细胞的增殖、迁移、 侵袭能力的影响以及可能的作用机制。 方法：通过脂质体介导，将化学合成的 Semaphorin4D siRNA 转染 A549 细胞， 采用实时荧光定量 PCR（Real time PCR）法，细胞免疫荧光法和 Western blot