番茄红素对永久性结扎双侧颈总动脉大鼠学习记忆能力及海马结构NIX参与的线粒体自噬的影响-神经生物学专业论文.docx

福建医科大学硕士学位论文 福建医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 3 目 录 英文缩略词表…………………………………………………………4 中文摘要………………………………………………………………5 英文摘要………………………………………………………………9 前言……………………………………………….………………… 13 材料和方法…………………………………...………………………17 结果…………………………..………………………………………26 讨论……………………………………………..……………………51 结论………………………………………………..…………………56 参考文献……………………………………………..………………57 综述……………………………………….……………………… 61 致谢……………………………………………….………………… 70 英文缩略词表（Abbreviation） DG HIF-1 HIF-1α HRE LC3 Dentate gyrus Hypoxia-inducible factor 1 Hypoxia-inducible factor 1α Hypoxia response element Microtubule-associated protein 1 齿状回 低氧诱导因子 1 低氧诱导因子 1α 低氧反应元件 微管相关蛋白轻链 3 light chain3 LC3-PE Microtubule-associated protein light chain 3-phosphatidylethanolamine 微管相关蛋白轻链 3 -磷脂酰乙醇胺 MPTP Mitochondrial permeability transition pore 线粒体通透性转运孔 NIX Nip3-like protein X/adenovirus 19kDa NIX 蛋白 interacting protein 3-like ROS Reactive oxygen species 活性氧 VD Vascular dementia 血管性痴呆 2VO 2-vessel occlusion 两血管结扎 Δψm Mitochondrial transmembrane potential 线粒体膜电位 中文摘要 血管性痴呆（Vascular dementia，VD）是指由于长期处于各种缺血性、出血性 及脑缺血缺氧性损害等脑血管病危险因素下，最终导致的获得性智能障碍综合征， 为老年期痴呆的常见类型之一。氧化应激是体内活性氧（Reactive oxygen species， ROS）的产生与清除失去平衡而导致的一系列氧化性损伤过程，现普遍认为氧化 应激是 VD 发生发展的主要危险因素之一。永久性结扎双侧颈总动脉（2-vessel occlusion，2VO）的大鼠通过阻断双侧颈总动脉血流使其脑组织处于低灌注低氧状 态，尤其容易使得海马、皮层等与认知功能有关的结构发生氧化应激，最终发生 学习记忆能力的损害。线粒体作为体内 ROS 产生的主要来源，亦是 ROS 攻击的重 要 靶 点 ， 后 者 使 得 线 粒 体 发 生 功 能 障 碍 ， 线 粒 体 膜 电 位 （ Mitochondrial transmembrane potential，Δψm）降低，引起线粒体通透性转运孔(Mitochondrial permeability transition pore,MPTP)开放，引发细胞凋亡或自噬等改变。番茄红素 （Lycopene）是类胡萝卜素家族中的一员，具有强有力的淬灭单个氧原子及清除 过氧化自由基的能力。因此，清除受损的线粒体，降低细胞 ROS 水平，拮抗氧化 应激很可能是干预治疗血管性痴呆的一种行之有效的手段。 线粒体自噬（Mitophagy）是线粒体在低氧、饥饿等应激状态下，损伤的线粒 体选择性的被自噬泡所吞噬降解的过程。在低氧环境中，适当的线粒体自噬可通 过及时清除受损线粒体而对细胞起到保护作用，然而过度的线粒体自噬则可引发 自噬性死亡等负性改变。NIX 蛋白（Nip3-like protein X,NIX）主要位于线粒体外 膜 ， 当 线 粒 体 受 到 损 害 时 ， NIX 表 达 上 调 ， 可 与 微 管 相 关 蛋 白 1 轻链 3 （microtubule-associated protein 1 light chain3，LC3）相结合，引起自噬体吞噬损伤 线粒体并与溶酶体相融合，以此清除受损线粒体。LC3 分为Ⅰ型和Ⅱ型，LC3-Ⅱ 的表达或 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ 的 比 值 可 反 映 细 胞 的 自 噬 水 平 。 低 氧 诱 导 因 子