单核苷酸制备及分离-发酵工程专业论文.docx

山东轻工业学院硕士学位论文 山东轻工业学院硕士学位论文 第一章 第一章 绪论 PAGE PAGE 13 PAGE PAGE 10 第 1 章 绪论 1.1 核苷酸的简介 1.1.1 核苷酸的种类 核苷酸（nucleotide，简称 NT）是由碱基、戊糖、磷酸组成的化合物，是核 酸的基本组成单位。按照核苷酸分子中戊糖种类的不同，可将核苷酸分为核糖核 苷酸和脱氧核糖核苷酸两种，前者是组成核糖核酸（(ribonucleicacid，简称 RNA） 的基本单位，后者是脱氧核糖核酸 (deoxyribonueleicacid，简称 DNA)的基本组 成单位；按照核苷酸分子中碱基的不同又分为：腺嘌呤核苷酸、鸟嘌呤核苷酸、 胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸和胸腺嘧啶核苷酸；根据核苷和磷酸形成磷酸二酯 键的位置不同，核苷酸分为 2’-核苷酸（核苷 2’-磷酸）、3’-核苷酸（核苷 3’-磷酸） 和 5’-核苷酸（核苷 5’-磷酸），其中 5’-核苷酸是常见的形式。大量的核苷酸通过 戊糖的第三位碳和相邻戊糖的第五位碳之间形成的磷酸二酯键连接起来，弯曲盘 旋形成多聚核苷酸，即核酸。 核酸是一种高分子化合物，是生命的遗传物质和基础，分为脱氧核糖核酸 （DNA）和核糖核酸（RNA）两种，它存在于一切生物细胞中，是由许多单体 核苷酸通过 3’、5’-磷酸二酯键聚合而成的，对生物的生长、遗传、变异等现象 都起着重要作用[1,2] 。 1.1.2 5’-核苷酸的的结构 5’-核苷酸是核苷酸最常见的的存在形式，包括四种 5’-核糖核苷酸和四种 5’- 脱氧核糖核苷酸，它们的结构式如下[3]： 图 1.1 5‘-核苷酸的结构 Table 1.1 Structure of 5’-nucleotides 1.1.3 核苷酸的理化性质[4] (1) 5’-腺嘌呤核苷酸：别名腺苷-5’-磷酸；腺一磷；一磷酸腺苷。分子式为 C10H14N6O7P，溶于热水，自丙酮水溶液中得到含 2 分子水的结晶（分子量 383.25）。 在 1mol/L 的盐酸溶液中 100℃下水解 1 小时可水解完全生成腺嘌呤、核糖和无 机磷。pK3.8（碱性基团）；＜1，6.2~6.4（磷酸根）。0~5℃保存。 (2) 5’-胞嘧啶核苷酸：别名是胞苷-5’-磷酸；胞一磷；一磷酸胞苷。分子式为 C9H14N3O8P，熔点为 233℃，在此温度下可分解。自含水乙醇中可以得到片状结 晶，分子量为 323.21。pK4.5（碱性基团）；＜1，6.3（磷酸根）；0~5℃储存。 (3) 5‘-鸟嘌呤核苷酸：别名鸟苷-5’-磷酸；鸟一磷；一磷酸鸟苷。分子式为 C10H14N5O8P，分子中含 1/2 分子水的结晶（分子量为 372.23）。在 1mol/L 的盐酸 中 100℃水解 1 小时可以得到鸟嘌呤、核糖和无机磷。其熔点为 190~200℃，在 此温度范围内可分解。pK2.4（碱性基团），9.4（酸性基团），＜1，6.1（磷酸基 团）。其钠盐的分子式为 Na2·GMP·H2O（分子量为 405.22）。0~5℃保存。 (4) 5‘-尿嘌呤核苷酸：别名尿苷-5’-磷酸；尿一磷；一磷酸尿苷。分子式为 C9H13N2O9P，熔点为 109~202℃。其钡盐的分子式为 Ba·UMP·H2O（分子量为 477.52），钠盐的分子式为 Na2·UMP·2H2O（分子量为 404.20）。pK9.5（碱基上的 磷酸基）；~1，6.4（磷酸根）。0~5℃保存。 由于核苷酸分子中的嘌呤碱和嘧啶碱都具有共轭结构，因此具有强烈吸收 240~260nm 紫外光的特性。不同碱基的紫外吸收特性不同，同一种碱基在不同 pH、不同波长下，紫外吸收值也不同。四种 5‘-核苷酸的紫外吸收特性如下图所 示： 表 1.1 5’-核苷酸的紫外吸收性质 核苷酸ε 最大 ε260 A250A280A290A260A260UMP112617.8 核苷酸 ε 最大 ε260 A250 A280 A290 A260 A260 UMP 11 261 7.8 7.7 241 0.80 0.31 0.02 2 280 13.2 6.3 241 0.44 2.09 1.55 7～11 271 9.1 7.4 249 0.84 0.98 0.33 2 257 15.0 14.5 230 0.84 0.22 0.04 7～12 259 15.4 15.3 227 0.79 0.15 0.01 1 256 12.2 11.6 228 0.98 0.67 0.29 GMP 7 252 13.7 11.7 224 1.18 0.66 0.29 11 258 11.8 11.5 230 0.90 0.61 0.29 pH λ 最大/nm λ 最小/nm CMP