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第二节 荧光定量分析方法 Quantitative analysis of fluorometry 一、荧光强度与物质浓度的关系 1. 观测方向: 与激发光源垂直 2. 原因: 消除透射光的影响 关于灵敏度的问题 紫外可见: 10-5 荧光: 10-7 ? ? ? ? ? cs Fs－F0 Fx－F0 cx 二、定量分析方法 1、标准曲线法 二、定量分析方法 2、比例法（对照法） 利血平的含量测定 作业 p230 7 三甲氧基苯甲酰 V2O5 λex 400nm λem 500nm 例 题 在测量分子荧光强度时，要在与入射光成直角的方向上进行测量，这是由于： A 荧光是向各个方向发射的，为了减小透射光的影响 B 只有在与入射光成直角的方向上，才有荧光 C 荧光强度比透射光强度小 D 荧光的波长比入射光波长长 第三节 荧光分光光度计 光源 激发单色器 样品池 发 射 单色器 检测器 1. 光源 2. 单色器： 3. 样品池： 4. 检测器： 荧光分光光度计的主要部件 氙灯： 波长范围250~700nm，300~400nm谱线强度几乎相等 光电倍增管 激发单色器、发射单色器 石英、四面透光 3、作用 荧光试剂 1、荧光探针 2、化学物质 （1）提高测定的灵敏度和选择性 （2）扩大荧光分析法的应用范围 1. 荧光胺 2. 邻苯二甲醛 3. 1－二甲氨基－5－氯化磺酰萘（丹酰氯） 4. 测定无机离子的荧光试剂 荧光试剂 Hu M, Yu H L, Wei F D, et al. Citrate-capped Mn-modified CdSe/CdS quantum dots as luminescent probes for levodopa detection in aqueous solution [J]. Spectrochimica Acta Part A, 2012, 91: 130-135 Hu M, Yu H L, Wei F D, et al. Citrate-capped Mn-modified CdSe/CdS quantum dots as luminescent probes for levodopa detection in aqueous solution [J]. Spectrochimica Acta Part A, 2012, 91: 130-135 Hu M, Yu H L, Wei F D, et al. Citrate-capped Mn-modified CdSe/CdS quantum dots as luminescent probes for levodopa detection in aqueous solution [J]. Spectrochimica Acta Part A, 2012, 91: 130-135 Hu M, Yu H L, Wei F D, et al. Citrate-capped Mn-modified CdSe/CdS quantum dots as luminescent probes for levodopa detection in aqueous solution [J]. Spectrochimica Acta Part A, 2012, 91: 130-135 Hu M, Yu H L, Wei F D, et al. Citrate-capped Mn-modified CdSe/CdS quantum dots as luminescent probes for levodopa detection in aqueous solution [J]. Spectrochimica Acta Part A, 2012, 91: 130-135 Hu M, Yu H L, Wei F D, et al. Citrate-capped Mn-modified CdSe/CdS quantum dots as luminescent probes for levodopa detection in aqueous solution [J]. Spectrochimica Acta Part A, 2012, 91: 130-135 （一）思考题：1、5－9、13－16、19、20 （二）选择题：3－5、7－11、13－19、21、22 （三）计算题：2 分析化学习题集 磺胺类药物的结构通式为， 试设计用仪器分析的方法分别测定磺胺原料药及人体口服磺胺药片后血浆中药物含量。 思 考 题 第11章 荧光分析法 fluorometry 基本概念