生物化学课件（第一分：1-3章）.ppt

（一）α-氨基参加的反应 1.与亚硝酸反应 2.与酰化试剂反应 3.烃基化反应 4.形成Schiff’s碱反应 5.脱氨基反应 NH2 OH R CH COOH + HNO2 R CH COOH+H2O+N2 Van Slyke 法测氨基氮（体积）的基础。 N2中的1/2为氨基氮。 氨基酸定量和蛋白质水解程度的测定。 NO2 F O2N + H2N—CH—COOH R NO2 O2N HN—CH—COOH R + HF 弱碱性 DNP-氨基酸 （黄色） DNFB Sanger 法测定N末端氨基酸基础 —N=C=S + N—CH—COOH H H R PITC —N—C—N—CH—COOH H H R S PTC-氨基酸 —N—C H R S N C C O PTH-氨基酸 pH8.3 无水HF 苯异硫氰酸酯PITC 苯氨基硫甲酰衍生物 苯乙内硫脲衍生物 Edman降解法基础  R’ COOH R’ COO C=O + H2N CH C=N CH H R H R 醛 氨基酸 Schiff’s碱 -H20 +H20 在生物体内经AA氧化酶催化 即脱去α-氨基而转变为酮酸。 （二） α-羧基参加的反应 1.成盐或成酯反应 2.成酰氯反应 3.脱羧基反应 4.叠氮反应 （2）成酯  NH2 干燥，HCl  R CH COOH + C2H5OH  回流  R CH COOC2H5 + H2O NH3·Cl 保护羧基 （1）与NaOH等形成盐 HN-保护基 R— CH-COOH + PCl5 HN-保护基 R — CH-COOCl + POCl3 + HCl 保护氨基 活化羧基 NH2 脱羧酶 R—CH-COOH R-CH2-NH2 +CO2  YNH O NH2NH2 R—CH—C—OCH3 YNH O HNO2 R—CH—C—NHNH2  YNH O R—CH—C—N -—N+ N + 2H2O 酰化氨基酸甲酯 肼 酰化氨基酰肼 酰化氨基酰叠氮 肽的人工合成 （三）α-羧基和α-氨基都参加的反应 1、 与茚三酮反应 2、 成肽反应 弱酸 加热 （四） 侧链R基参加的反应 1、Tyr 2、碱性AA 2、碱性AA 3、带硫AA Tyr酚基在3和5位上易发生亲电取代反应， 如碘化和硝化 黄色反应 Pauly反应 His侧链咪唑基与重氮苯磺酸生成棕红色化合物 Pauly反应 Arg侧链胍基与环己二酮生成缩合物 Trp侧链吲哚基能被 N-溴代琥珀酰亚胺氧化 ——分光光度法测定Trp含量 Met侧链上甲硫基：强亲核基团与烃化试剂成锍盐 保护巯基 与二硫硝基苯甲酸发生硫醇-二硫化物交换 pH8.0时412nm最大光吸收 —分光光度法测定-SH Cys的巯基不稳定，易被氧化成二硫键 巯基在有痕量的金属离子如： Cu2+，Fe2+，Co2+或Mn2+时，易被氧化 Cys中的二硫键可被氧化剂（过甲酸）以及还原剂（巯基化合物）打开。 磺基丙氨酸 五、AA的光学活性和光谱性质 （一）AA的光学活性和立体化学 （二）氨基酸的光谱性质 可见光区：无吸收 远紫外和红外区：都吸收 近紫外区（200—400nm）：Tyr/Trp/Phe 原因：-C=C-C=C-C=C-C=C- 1、紫外吸收光谱 Trp 280nm Tyr