水体中大肠菌群的测量.pptx

Central Laboratory of Biology微生物学实验水体中大肠菌群的测定 目的要求 【目的要求】　1. 学习和掌握大肠菌群的测定方法　2. 了解测定过程中每一步的反应原理。基本原理大肠菌群是一群能在37℃培养48h内发酵乳糖产酸、产气的需氧或兼氧革兰氏染色阴性无芽抱杆菌。以大肠杆菌为主，包括肠细菌属、柠檬酸细菌属、埃希氏菌属和克雷伯氏菌属等。 因为大肠菌群在肠道和粪便中数量非常高，且与肠道和粪便中的病原菌生活习性相近，可作为判断样品是否被人、畜粪便污染的标志。 基本原理大肠菌群的测定方法一般采用多管发酵法，此法是根据大肠菌群具有发酵乳糖产酸产气的特性，利用含乳糖的培养基培养不同稀释度的样品，最后根据结果查最大自然数表，算出水中的大肠菌群数。 实验用品1. 被检样品　根据不同需要选择检检样品（如青山湖水）。2. 培养基　乳糖蛋白胨发酵培养基 蛋白胨10g，牛肉膏3g，乳糖5g，NaCl 5g，蒸馏水l000mL，1.6%溴甲酚紫乙醇溶液lmL。调pH 至7.2，分装试管（l0mL/管），并放入倒置杜氏小管，l21℃湿热灭菌20min。3. 仪器　天平，培养箱，水浴锅，德氏管，试管，刻度吸管，涂布器等。 方法步骤发酵试验 在三倍浓缩乳糖培养基中加入稀释度为10-1、10-2、10-3的被检样品1mL，每个稀释度各3个重复，混匀置37℃培养24h。2. 观察实验结果 培养24h后如不产酸（乳糖发酵液变黄色）、产气（小指管底部有气泡）和不变浑浊者为阴性反应，产酸产气或仅产酸的乳糖发酵管为阳性反应。3.结果计算（查MPN计数表） 实验结果 1. 将实验测出的各样品大肠菌群数以报表方式报告结果。2. 对样品大肠菌落数作出是否符合卫生要求的结论。 Central Laboratory of Biology水体中大肠菌群的测定微生物学实验 目的要求【目的要求】　1. 学习和掌握大肠菌群的测定方法　2. 了解测定过程中每一步的反应原理。 基本原理大肠菌群是一群能在37℃培养48h内发酵乳糖产酸、产气的需氧或兼氧革兰氏染色阴性无芽抱杆菌。以大肠杆菌为主，包括肠细菌属、柠檬酸细菌属、埃希氏菌属和克雷伯氏菌属等。 因为大肠菌群在肠道和粪便中数量非常高，且与肠道和粪便中的病原菌生活习性相近，可作为判断样品是否被人、畜粪便污染的标志。 基本原理大肠菌群的测定方法一般采用多管发酵法，此法是根据大肠菌群具有发酵乳糖产酸产气的特性，利用含乳糖的培养基培养不同稀释度的样品，最后根据结果查最大自然数表，算出水中的大肠菌群数。 实验用品1. 被检样品　根据不同需要选择检检样品（如青山湖水）。2. 培养基　乳糖蛋白胨发酵培养基 蛋白胨10g，牛肉膏3g，乳糖5g，NaCl 5g，蒸馏水l000mL，1.6%溴甲酚紫乙醇溶液lmL。调pH 至7.2，分装试管（l0mL/管），并放入倒置杜氏小管，l21℃湿热灭菌20min。3. 仪器　天平，培养箱，水浴锅，德氏管，试管，刻度吸管，涂布器等。 方法步骤发酵试验 在三倍浓缩乳糖培养基中加入稀释度为10-1、10-2、10-3的被检样品1mL，每个稀释度各3个重复，混匀置37℃培养24h。2. 观察实验结果 培养24h后如不产酸（乳糖发酵液变黄色）、产气（小指管底部有气泡）和不变浑浊者为阴性反应，产酸产气或仅产酸的乳糖发酵管为阳性反应。3.结果计算（查MPN计数表） 实验结果1. 将实验测出的各样品大肠菌群数以报表方式报告结果。2. 对样品大肠菌落数作出是否符合卫生要求的结论。