粉尘对血管内皮细胞的损伤效应研究-劳动卫生与环境卫生学专业论文.docxVIP

华中科技大学硕士学位论文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 PAGE 10 PAGE 10 内皮细胞外形和功能的损伤。为此，我们收集了来自江西和湖南的 4 个瓷厂和 4 个钨 矿作业点空气中的呼吸性粉尘，以及不同粒径的石英粉尘和碳黑粉尘，分别将粉尘体 外直接作用于血管内皮细胞。本研究分为两部分：一、瓷厂和钨矿生产性粉尘对血管 内皮细胞的损伤效应；二、不同粒径粉尘对血管内皮细胞的损伤效应。 第一部分 瓷厂和钨矿生产性粉尘对血管内皮细胞的损伤效应 目的：评价瓷厂和钨矿粉尘对血管内皮细胞形状和功能的损伤作用。 方法：以人脐静脉内皮细胞（HUVEC）为靶细胞，采集来自江西和湖南 4 个瓷 厂(A、B、C、D)和 4 个钨矿(E、F、G、H)作业点呼吸性粉尘为本次实验粉尘，以中 国标准石英为对照粉尘，将粉尘配制成 25、50、100、200、400 μg/ml5 个浓度，与 HUVEC 共培养 24 h 后，测定细胞乳酸脱氢酶活力（LDH）、细胞活力（MTT）、一氧 化氮（NO）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的释放量。 结果：（1）瓷厂和钨矿粉尘及标准石英均能损伤 HUVEC 细胞膜，引起细胞上清 液中 LDH 活力升高，并随粉尘浓度升高而呈现剂量-反应关系，同类型厂矿的粉尘引 起 LDH 活力升高的能力不同。综合而言，瓷厂和钨矿粉尘诱导 LDH 活力升高的能力 接近，略低于标准石英。 （2）随着粉尘浓度的增高，HUVEC 细胞存活率呈下降趋势，瓷厂粉尘的作用能 力略强于钨矿粉尘。在较低剂量组（25, 50, 100 μg/ml）时，瓷厂和钨矿粉尘诱导细胞 活力下降的能力强于标准石英，而在高剂量组（200, 400 μg/ml），厂矿粉尘诱导细胞 活力下降的能力低于标准石英。 （3）瓷厂和钨矿粉尘及标准石英诱导 HUVEC 释放的 NO 随粉尘浓度升高而增 高。除个别矿粉尘诱导 NO 释放的能力强于石英外，其余厂矿粉尘诱导 HUVEC 释放 NO 的能力相近且与标准石英相当。 （4）瓷厂和钨矿粉尘及标准石英诱导 HUVEC 释放的 TNF-α 随粉尘浓度升高而 增高。瓷厂和钨矿生产性粉尘诱导 HUVEC 释放 TNF-α 的能力相当，在较低剂量组（25, 50, 100 μg/ml）时厂矿粉尘诱导细胞释放 TNF-α 的能力与标准石英相当，但在较高剂 量组（200, 400 μg/ml）时厂矿粉尘诱导细胞释放 TNF-α 的能力远低于标准石英。 第二部分 不同粒径粉尘对血管内皮细胞的损伤效应 目的：通过比较不同粒径粉尘的生物学作用来探讨粉尘粒径在损伤作用中所起的 作用，评价粒径对粉尘致血管内皮细胞损伤的影响。 方法：以人脐静脉内皮细胞（HUVEC）为作用细胞，选择三种不同粒径的欧洲 标准纯石英 DQ12（DQPM1, 1 μm; DQPM3~5, 3~5 μm; DQPM5, 5 μm）和两种不同 粒径的碳黑粉尘（CB0.1, 0.1 μm; CB1, 1 μm）为实验粉尘，并选用中国标准石英（5 μm 的呼吸性组分）为对照粉尘，将粉尘配制成 25、50、100、200、400 μg/ml5 个浓 度，与 HUVEC 共培养 24 h 后，测定细胞乳酸脱氢酶活力（LDH）、细胞活力（MTT）、 一氧化氮（NO）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的释放量。 结果：（1）各组粉尘均使 HUVEC 培养液中 LDH 活力升高，有剂量-反应关系。 DQ12 粒径越小诱导 LDH 活力升高的能力越强。碳黑粉尘中，在较低剂量组（25, 50, 100 μg/ml）时，CB0.1 诱导 LDH 活力升高的能力强于 CB1，当粉尘剂量达到和超过 200 μg/ml 时，CB0.1 诱导 LDH 活力升高的能力却低于 CB1。 （2）随着不同粒径粉尘样品浓度的升高，HUVEC 的活力呈现下降的趋势。DQ12 引起 HUVEC 细胞活力下降呈现为粒径越小，细胞活力下降越大。碳黑粉尘在较低剂 量组（25, 50, 100 μg/ml）时 CB0.1 引起 HUVEC 细胞活力下降的能力稍强于 CB1，但 在粉尘剂量达到及超过 200 μg/ml 时， CB0.1 引起 HUVEC 细胞活力下降的能力弱于 CB1。 （3）不同粒径的粉尘样品均能诱导 HUVEC 释放 NO 水平增高，且随着粉尘浓 度的升高而呈现增高的趋势。不同粒径 DQ12 诱导细胞释放 NO 能力接近。碳黑粉尘 CB0.1 在各个剂量水平下诱导 HUVEC 释放 NO 的能力都略强于 CB1。 （4）不同粒径的粉尘均能诱导 HUVEC 释放 TNF-α，有剂量-反应关系。DQ12 粉尘粒径越小，诱导细胞释放 TNF-α的能力越强。碳黑粉尘除 400μg/ml 剂量