伏毛铁棒锤有效部位对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的初步研究-药理学专业论文.docx

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伏毛铁棒锤有效部位对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的初步研究-药理学专业论文

万方数据 万方数据 宁夏医科大学学位论文独创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文,是个人在导师的指导下,独立进 行研究工作所取得的成果,无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明 引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品 成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式 标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 论文作者签名_____ 论文导师签名_____ 年 月 日 年 月 日 宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明 宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文,同意学校按规定向国家有 关部门机构送交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阅。本人授权宁 夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检 索,可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公 布(包括刊登)论文的全部或部分内容。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名_____ 论文导师签名_____ 年 月 日 年 月 日 宁夏医科大学硕士论文中文摘要 宁夏医科大学硕士论文 中文摘要 伏毛铁棒锤有效部位对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的初步研究 摘 要 目的 探讨伏毛铁棒锤有效部位对实验性类风湿性关节炎(RA)的治疗作用及作用 机制。 方法 1. 采用溶剂法对伏毛铁棒锤进行提取,利用大孔吸附树脂、阳离子交换树脂技术对 伏毛铁棒锤有效部位进行富集;采用紫外分光光度法对伏毛铁棒锤非生物碱有效部位总 黄酮类成分进行含量测定。 2. 通过 MTT 比色法观测伏毛铁棒锤有效部位、有效成分对小鼠脾淋巴细胞增殖反 应的影响。 3. 雄性 SD 大鼠 72 只,体重 180 士 20 g,随机分为 9 组。除空白组外,其余各组 大鼠右后足垫皮内注射完全弗氏佐剂(Freund’s Complete Adjuvant,CFA)制备大鼠佐剂性 关节炎(adjuvant arthritis, AA )模型。造模后第 8 天开始灌胃给药,每日一次。30%醇部 位高、中、低剂量组以 30%醇洗脱部位的溶液(60,30,15 mg/kg)灌服;非生物碱部位 高、中、低剂量组以非生物碱部位溶液(120,60,30 mg/kg)灌服;阳性药对照组以雷公 藤多苷片混悬液(9.45 mg/kg)灌服;空白对照组、模型对照组以 0.5%的 CMC-Na 水溶液 灌服。连续灌胃给药 21 天,于末次给药 2 h 后对大鼠进行相应处理。 4. 采用 HE 染色、关节肿胀度、多发性关节炎指数、体重等指标对大鼠 AA 模型制 备进行评价,并利用上述指标观察伏毛铁棒锤有效部位对 AA 大鼠的治疗作用。 5. 利用 ELISA 法检测 AA 大鼠血清中的 IL-1β、IL-2、IL-4 、IL-5、IL-6、IL-17 及 TNF-α的含量;免疫组化法(Immunohistochemistry, IHC)观察血管内皮生长因子(vasc ular endothelial growth factor, VEGF)和基质金属蛋白酶-3(Matrix metalloproteinases-3, MMP-3)在滑膜组织中的表达情况。 结果 I 1. 伏毛铁棒锤干燥块根 3 kg 经提取后得到了粗提浸膏 0.3 kg,大孔吸附树脂富集 到了 30%醇部位 12.3 g,得率为 4.1%;取 30%醇部位浸膏 8 g,通过阳离子交换树脂分 离,得到非生物碱部位 4 g,得率为 50%。 2. 伏毛铁棒锤原药材中总黄酮含量为 1.2%,大孔吸附树脂 30%乙醇洗脱部位中总 黄酮含量为 9.6%;经阳离子交换树脂分离,得到的非生物碱有效部位总黄酮含量为 29.26%。 3. 蒙花苷(0.05,0.01 mg/kg), 30%醇部位(3.12 g/kg)可明显抑制 ConA 诱导的小鼠 脾淋巴细胞增殖反应(p0.05)。 4. 伏毛铁棒锤大孔吸附树脂 30%醇部位(60,30 mg/kg)、非生物碱部位中剂量组(6 0 mg/kg)灌服,可减轻 AA 大鼠继发性足肿胀(p0.05),显著降低大鼠多发性关节炎指 数(p0.05),缓解 AA 大鼠体重的下降(p0.05),同时明显减轻病变关节滑膜炎症与增生、 防止关节软骨及骨质的破坏。 5. 伏毛铁棒锤 30%醇部位(60,30 mg/kg)、非生物碱部位中剂量组(60 mg/kg)抑制 AA 大鼠血清中炎性细胞因子 IL-1β、IL-4 、IL-5、TNF-α、IL-6 分泌(p0.05),提高 I L-2、IL-17 含量(p0.05)。 6. 伏毛铁棒锤大孔吸附树脂 30%乙醇洗脱部位(60,30 mg/kg),非生物碱部位中剂 量组(60 mg/kg)可下调 VEGF 在血管壁的表达

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