实验一、16S rRNA基因的PCR扩增、电泳及统发育分析.pptVIP

FASTA格式文件 找到刚才保存的文件 实 验 结 果 电泳图片（表明样品名称和Marker 分子量，目的片段大小） 构件一个系统发育树 马玉超 北京林业大学生物科学与技术学院 办公地点：生物楼117；电话 Email:myc0307@ 现代微生物学实验技术 实 验 内 容 ?16S rRNA基因的PCR扩增、电泳及系统发育分析 ?染色体步移法克隆已知序列的侧翼序列 ? 大肠杆菌β-半乳糖苷酶的诱导表达 ? 利用SDS分析融合蛋白的可溶性 ? 绿色糖单胞菌的发酵及孢外酶的提取 16S rRNA基因的PCR扩增、电泳 及系统发育分析 窦 桂 铭 实 验 目 的 掌握PCR的原理，增强对PCR重要性的认识； 掌握电泳技术及系统发育分析的方法，为将来课题研究奠定基础。 PCR（Polymerase Chain Reaction）法，又称为聚合酶链反应或PCR扩增技术，是一种高效快速的体外DNA聚合程序 设想—实现—改进与完善 72℃ 94℃ 55℃ PCR循环 PCR技术的反应原理 PCR技术的反应原理 DNA或RNA模板 5′ 5′ 待扩增DNA区域 3′ 94℃ 5 min 5′ 5′ 55℃ 退火 5′ 5′ 聚合 3′ 3′ 5′ 5′ 3′ 循环25-30次 变性 70℃ DNA引物 DNA聚合酶 dNTPs Mg2+（缓冲