蛋白质分子基础白质制备.pptVIP

蛋白质的脱盐 方法 处理量 操作时间 操作难度 透析 少量或数十毫升 5小时以上 容易 纤维过滤透析 大量样品 0.5 小时 稍难 分子筛 少量或数十毫克 数小时 稍难 蛋白质的浓缩 沉淀法： 用盐析法或者有机溶剂法将蛋白质沉淀，再将沉淀溶于少量溶液中。 吸附到离子交换柱上，然后用少量盐洗脱。 干燥吸附法： 用固体吸附剂如Sephadex G25等，冻干法，真空干燥法。 渗透浓缩法： 将干粉PEG-20000涂在装有蛋白质溶液的透析袋上，可吸干水分。 超滤浓缩法： 用超滤膜滤去小分子和水，达到超滤的目的。 在一定的密封容器，施加一定压力使一定分子量的物质透过超滤膜。 超过滤法 蛋白质溶液 半透膜 支持膜的栅板 超滤液 加压 沉淀法分级蛋白质 蛋白质溶液 蛋白质分子表面带有亲水基团----- 具有水化作用，可以和水结合，进入水溶液当中。 在溶液的pH值偏离等电点时，蛋白质就会带同样的电荷，导致同性相排斥，使蛋白质分子进一步分散。 等电点时整个蛋白质是中性的，水化作用此时最弱，蛋白质的溶解度值最小。 沉淀蛋白质的方法学 破坏蛋白质分子之间的水化作用。 减弱蛋白质分子之间同性相排斥的作用。 沉淀蛋白质的常用方法 盐析法 有机溶剂法 有机聚合物沉淀法 选择性变性沉淀法 盐析法 是一种向蛋白质溶液中加入浓的盐溶液使蛋白质变性