细胞生物研究方法ppt课件.pptVIP

第二章.細胞生物學研究方法 顯微鏡技術 細胞的分離和培養 細胞組分的分離和純化技術 細胞化學和細胞內分子示蹤技術 細胞功能基因組學研究技術 第一節 顯微技術 光學顯微鏡：以可見光（或紫外線）為光源。 電子顯微鏡：以電子束為光源。 （一）普通光學顯微鏡 1. 構成： ①照明系統 ②光學放大系統 ③機械裝置 2. 原理：經物鏡形成倒立實像，經目鏡進一步放大成像。 3. 分辨力：指分辨物體最小間隔的能力。 R=0.61λ/N．A． 其中λ為入射光線波長；N．A．為鏡口率 ＝ｎsinα/2，n=介質折射率；α=鏡口角（樣品對物鏡鏡口的張角） 。 思考：如何提高顯微鏡的分辨能力？ （二）螢光顯微鏡 Fluorescence microscope 特點：光源為紫外線，波長較短，分辨力高於普通顯微鏡； 有兩個特殊的濾光片； 照明方式通常為落射式。 用於觀察能激發出螢光的結構。用途：免疫螢光觀察、基因定位、疾病診斷。 荧光显微镜照片（微管呈绿色、微丝红色、核蓝色） （三）鐳射共聚焦掃描顯微境 Laser confocal scanning microscope, LCSM 用鐳射作光源，逐點、逐行、逐面快速掃描。 能顯示細胞樣品的立體結構。 分辨力是普通光學顯微鏡的3倍。 用途類似螢光顯微鏡，但能掃描不同層次，形成立體圖像。 鐳射共聚焦掃描顯微鏡 二、電子顯微鏡